Tema 11.2-Estudio de La hemostasia Primaria, Coagulacion y Fibrinolisis

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    10-Apr-2015

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Tema 11.2ESTUDIO DE LA HEMOSTASIA PRIMARIAEstudios inespecficos de hemostasia primaria Recuento de plaquetas Mtodo manual Mtodo automtico Tiempo de sangria Mtodos de filtrado a elevado shear stressTema 11.2Tema 11.2 ESTUDIO DE LA HEMOSTASIA PRIMARIA, LA COAGULACIN Y LA FIBRINLISISBioqumica Clnica i Hematologia Bioqu ClBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07ESTUDIO DE LA COAGULACIN SANGUNEAEstudios coagulativos Generalidades de la fase preanaltica. Generalidades de la fase analtica Tiempo de protombina (TP): explora va extrnseca Tiempo de tromboplastina parcial activado (TTPA): explora va intrnseca Fibringeno.Tiempo de trombina.Tiempo de reptilase Determinacin de la actividad de los factores de la coagulacin Valoracion de los inhibidores de la coagulacin (antitrombina, protena C, protena S) Valoracion de activadores e inhibidores de la fibrinolisis (plasmingeno, t-PA, antiplasmina, PAI-1) Valoracion de los productos de degradacion de la fibrina estabilizada.. Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Dmero-DESTUDIO DE LA FIBRINOLISISTema 11.2Tema 11.2Estudios inespecficos de hemostasia primaria Recuento de plaquetas ESTUDIO DE LA HEMOSTASIA PRIMARIAMETODO MANUALSangre venosa (EDTA) o capilar Dilucin a 1/100, mediante Unopette o capilar aforado, en oxalato amnico (solucin hemolizante) Lectura en cmara cuentaglbulos: Burker, Neubauer. Microscopio para contraste de fases y objetivo x 40.(CV: 11 %)Estudios inespecficos de hemostasia primaria Recuento de plaquetas Mtodo manual Mtodo automtico Tiempo de sangria Mtodos de filtrado a elevado shear stressMETODOS AUTOMATICOSMtodos de resistencia elctrica Mtodos pticos (CV: 2-4 %)Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-071Tema 11.2Tema 11.2Mtodo manual Cmara cuentaglbulosMtodo manual Cmara cuentaglbulosZONA LECTURAZONA LECTURABioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Tema 11.2Tema 11.2Contadores automticos Principio de medidaLas clulas se distribuyen en diferentes cmaras o canalesMUESTRA ASPIRADAContadores automticos Principio de medidaPrincipio de la impedancia o corriente elctricaLEU HB ERI PLTSe reconocen impulsos elctricos por unidad de tiempo: - nmero de partculas - volumen de las mismasBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-072Tema 11.2Tema 11.2Contadores automticos Representacin grfica de las poblaciones HistogramasPaquetas, VPM, IDPRecuento automtico de plaquetas Causas de error No se cuentan las plaquetas de gran tamao Recuento de eritrocitos microcticos o esquistocitos Pseudotrombocitopenia por aglutinacin in vitro en presencia de EDTA: observar el frotis de sangre y comprobar recuento con sangre extrada en el tubo de citrato (tapn azul -coagulacin)Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Contadores automticos Lmites de alarmaTema 11.2Tema 11.2Plaqueta gigantePlaqueta dismrficaLLPresencia de agregados de plaquetas Presencia de esquistocitos o hemates pequeos Presencia de eritroblastosBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07PSEUDOTROMBOCIOPENIA EDTA DEPENDIENTEBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-073Estudios inespecficos de hemostasia primaria Tiempo de sangria Definicin :Tema 11.2Estudios inespecficos de hemostasia primaria Tiempo de sangriaTema 11.2Es el tiempo que se obtiene al medir la duracin del sangrado que se produce tras aplicar una incisin cutnea de unas caractersticas precisas. Significado : Su prolongacin puede reflejar alteraciones: Cualitativas de las plaquetas o del factor von Willebrand Cuantitativas de las plaquetas o del factor von Willebrand Defecto en la funcin de la pared vascular Limitaciones : Procedimiento de escasa reproductibilidad Factores que contribuyen a su alargamiento: temperatura de la superficie corporal, o caractersticas de la piel, la incisin,etcBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Mtodo de DukeNo aconsejable por su escasa sensibilidad y reproductibilidadMtodo de IvyDurante la prueba se mantiene un esfigmomanmetro a 40 mmHg. Realizacin de un corte en la parte superior de la cara anterior del antebrazo, poniendo en marcha el cronmetro. La sangre que brota se recoge cada 30 s, sin tocar los bordes de la herida. Anotar el tiempo que tarda en cesar la hemorragia.Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Tema 11.2Tiempo de sangra mtodo de ivy RealizacionTema 11.2 Estudios inespecficos de hemostasia primaria Mtodos de filtrado a elevado shear stress: PFA-100Definicin :Mtodo ex vivo alternativo al tiempo de sangra que se basa en un sistema de flujo sanguneo sometido a un elevado coeficiente de cizalladura, que simula el flujo arteriolar, mediante el paso de sangre total citrada a travs de una membrana cubierta por agonistas plaquetares: colgeno+ADP(col/ADP) o colgeno+epinefrina (Col/Epi). El valor a medir es el tiempo que tarda en obturarse la membranaSignificado : El alargamiento del tiempo de obturacin Col/Epi detecta: Disfuncin plaquetar por defectos plaquetares intrnsecos (enfermedad von Willebrand) o presencia de agentes antiagregantes plaquetares El alargamiento del tiempo de obturacin Col/ADP detecta Disfuncin plaquetar por defectos plaquetares intrnsecos (enfermedad von Willebrand) No es sensible a la accin de antiagregantes plaquetares: aspirina y anlogos. Por tanto si este es normal el alargamiento Col/Epi se debe a la presencia de estos.Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-074Tema 11.2Tema 11.2Estudios inespecficos de hemostasia primaria Mtodos de filtrado a elevado shear stress: PFA-100 Limitaciones : Se altera por disminucin en la cifra de plaquetas Se altera por disminucin en el hematocritoHemostasia primaria Valores de referencia Recuento de plaquetas:150 400 x 109 / LVentajas : No es sensible a la heparinizacin: permite el estudio de la funcin plaquetar en pacientes heparinizados Para el estudio de la enfermedad von Willebrand posee una sensibilidad y una especificidad claramente superiores a la del tiempo de sangriaBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Tiempo de sangra (Ivy): 8 minutos PFA- 100 Col/Epi 65 - 161 segundos Col/ ADP 51 - 123 segundosBioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Tema 11.2Tema 11.2ESTUDIO DE LA COAGULACIN SANGUNEA Estudios coagulativos Generalidades de la fase preanaltica. Generalidades de la fase analtica Tiempo de protombina (TP): explora va extrnseca Tiempo de tromboplastina parcial activado (TTPA): explora va intrnseca Fibringeno.Tiempo de trombina.Tiempo de reptilase Determinacin de la actividad de los factores de la coagulacin Valoracion de los inhibidores de la coagulacin (antitrombina, protena C, protena S)Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07Estudios coagulativos GeneralidadesEl estudio de la coagulacin segn el esquema clsico (va intrnseca, va extrnseca y va comn) sigue teniendo su utilidad prctica en el diagnstico de sndromes hemorrgicos Dos pruebas coagulativas inespecficas como el tiempo de protombina (TP) y el tiempo de tromboplastina parcial activado (TTPA) permiten detectar la mayor parte de sndromes hemorrgicos nicamente el factor XIII no queda explorado por dichas pruebasDefinicinSe trata de estudios realizados generalmente sobre plasma pobre en plaquetas (PPP) en el que se induce la fibrinoformacin bajo ciertas condiciones fsicas y qumicas La formacin de fibrina se puede valorar por: 1. Mtodos mecnicos: capacidad de la fibrina de atrapar partculas 2. Mtodos pticos: medicin del cambio de la turbidez del plasma Bioqumica Clnica i Hematologia curs 2006-07 producido al consumirse el fibringeno5Tema 11.2Tema 11.2Generalidades de la fase preanaltica Obtencin de sangre:Puncin venosa limpia Aspirarse la sangre en contenedores que no activen el sistema de contacto: polipropileno, cristal siliconado Se ha de mezclar con citrato trisdico (0,109mol/L (3,2%)0,129mol/L (3,8%)) en proporcin de volmenes 9:1, se bloque as la actividad coagulativa del calcio Se transporta entre 5-20 C, si se enfra a 4 C se induce la activacin del factor VII Se centrifuga (lo antes posible) para obtener PPP a 2000xg durante 10-15 minutos Se procesa en un plazo breve (

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