Práctica Nº 9:ESTUDIO DE ORGANELAS CELULARES: MITOCONDRIAS, LISOSOMAS, CLOROPLASTOS Y PLASTIDIOS.

  • Published on
    12-Jan-2016

  • View
    514

  • Download
    1

DESCRIPTION

Prctica de Laboratorio N9TEMA:ESTUDIO DE ORGANELAS CELULARES: MITOCONDRIAS, LISOSOMAS, CLOROPLASTOS Y PLASTIDIOS.REA:Biologia celular y molecularMedicina I ,USJB

Transcript

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA MOLECULARPRCTICA N 9ESTUDIO DE ORGANELAS CELULARES: MITOCONDRIAS, LISOSOMAS, CLOROPLASTOS Y PLASTIDIOS.I.INTRODUCCIN:Mediante esta prctica reconoceremos las siguientes organelas celulares: Mitocondrias, lisosomas, cloroplastos y plastidios para seguir conociendo la estructura de la clula ,teniendo un conocimiento terico previo a la prctica la cual nos ayuda a desenvolvernos durante el procedimiento de la prctica .Al final de la prctica lograremos cumplir los objetivos trazados para la prctica, finalmente sacaremos las conclusiones de lo observado durante la prctcia. II. OBJETIVO: Mediante el empleo de la tcnica de coloracin vital se observarn las mitocondrias presentes slo en el citoplasma de las clulas Eucariotas, que vienen a constituir las centrales de energa porque producen y almacenan energa bajo la forma de ATP. Las clulas tienen vesculas membranosas que contienen enzimas hidrolticas que permiten la digestin intracelular y que corresponden a los lisosomas los cuales pueden pueden ser identificados en protozoarios con una tincin vital. Con el uso de suero fisiolgico observar plastidos en las clulas vegetales eucariticas, los que contienen pigmentos y pueden sintetizar y acumular diversas sustancias, como los Leucoplastos que son plastidos incoloros, los Amiloplastos que acumulan almidn, los Proteinoplastos que acumulan protenas, los Elaioplastos que acumulan grasas y aceites esenciales. Los Cromoplastos son plastidos coloreados como el Caroteno que presenta un pigmento de color naranja, el Licopeno de color rojo, la Xantofila de color amarillo y los Cloroplastos que presentan un pigmento de color verde y cuya funcin principal es realizar la fotosntesis.III.MARCO TEORICO:Siguiendo con el tema de aclarar algunos conceptos, en el idioma ingls una palabra se puede traducir en 5 a 6 trminos diferentes al espaol, esto es lo que pasa con el concepto deORGANELA. UnaORGANELA(ORGANELOoELEMENTO CELULAR), es un cuerpo membranoso interno, rodeado por elCITOSOL,debe diferenciarse de losorgnulos( oMICROCUERPOS), pues estos ltimos no poseen membrana. Debe aclararse este asunto de que no todo lo que se encuentra en el interior de una clula se llamaORGANELAuORGANELO. LasORGANELASson estructuras membranosas y hay otras estructuras que no tienen membrana pero que se llamanMICROCUERPOS,adems muestran una diferencia de tamao muy notable al compararla con lasORGANELAS.La forma correcta de clasificar lasORGANELASes de acuerdo a laCANTIDAD DE MEMBRANASque stas posean, existiendoORGANELASde 1, 2 y 3 membranas .A Continuacin explicaremos con detalles las organelas a observar en la presente prctica de la laboratorio LISOSOMAS:Loslisosomassonorgnulosrelativamente grandes, formados por elretculo endoplasmtico rugosoy luego empaquetadas por elcomplejo de Golgi, que contienenenzimashidrolticas y proteolticas que sirven para digerir los materiales de origen externo (heterofagia) o interno (autofagia) que llegan a ellos. Es decir, se encargan de ladigestin celular.1Son estructuras esfricas rodeadas de membrana simple. Son bolsas de enzimas que si se liberasen, destruiran toda la clula. Esto implica que la membrana lisosmica debe estar protegida de estas enzimas. El tamao de un lisosoma vara entre 0,1-1,2m.Cuando se forman, loslisosomas se cargan con enzimas de funcinhidroltica; este tipo delisosoma, conocido comoLISOSOMA PRIMARIO, puede ser el que tiene una apariencia homognea en su interior (1). a partir de este, ellisosomase encarga de degradar la mayora de los tipos de molculas bioqumicas que hay en la clula.Las otras formas (losLISOSOMAS SECUNDARIOS, como el 2 y 3) son heterogneos y pueden recibir nombres variados comolisosomas con formas mielnicas (4), cuerpos multivesiculares (5), o cuerpos residuales (6). estos tipos se producen por efecto del almacenamiento en ellumendellisosomade sustancias que no pueden degradarse ms o por la transformacin en lisosomas de otro tipo de orgnulos como son losautofagosomasy losendosomas.Susfuncionesson: acumular agua aumentando el volumen de la clula sin aumentar el tamao del citoplasma ni su salinidad; almacenar sustancias energticas, txicas, venenos, sustancias de desecho, etc. Constituyen el medio de transporte de sustancias entre orgnulos del sistema endomembranoso. En clulas animales existen adems vacuolas fagocticas, pinnocticas y pulstiles.Entre las inclusiones, las funciones ms importantes son almacenar resinas o ltex.Enzimas ms importantes del lisosoma: Lipasas, que digierelpidos; Glucosidasas, que digierecarbohidratos; Proteasas, que digiereprotenas; Nucleasas, que digierecidos nucleicos. LOSCLOROPLASTOS:los cloroplastos, constituyen los organelos ms conspicuos de una clula vegetal. Los cloroplstos estn rodeados por una doble membrana, con una estructura interna constituida por un sistema de membranas, separadas por una matriz de naturaleza proteica llamada estroma, poseen DNA con una estructura similar al encontrado en clulas procariticas, as como ribosomas, embebidos en el estroma. Su interior (estroma) est recorrido por membranas internas llamadas tilacoides. En estas membranas se encuentran los pigmentos fotosintticos y los citocromos transportadores de electrones para efectuar la fase luminosa de la fotosntesis; en el estroma se realizan las reacciones del ciclo de Calvin para fijar el CO2 en la fase oscura de la fotosntesis. PLASTIDIOSSon parte caracterstica de las clulas vegetales. Cada Plastidios est rodeado por una membrana doble. Dentro de esa doble membrana tenemos el estroma que es la substancia acuosa contenida en el Plastidios. Los Plastidios se clasifican de acuerdo al tipo de pigmento que contengan.Pigmentos que poseen los plastidios:Por los pigmentos que poseen los plastidios, son de las siguientes clases:Cloroplastos: (cloros =verde): plastidios de color verde, por llevar un pigmento verde llamadoclorofila.Cromoplastos: (cromo = color) plastillos, pigmentos colorantes como el pigmentorojo(lecopeno)amarillo(xantofila)anaranjado(caroteno). Son los que dan color a lasfloresy a lasfrutasde muchas plantas.Leucoplastos: (leucos =blancos) plastidios incoloros que sirven como centro de almacenado de ciertos materiales decitoplasmacomo en el caso delalmidn(amiloplastos).Oleoplastos: Plastidios incoloros y almacenado de gotitas deaceitestales comoman,semillasdehiguerilla, etc. LAS MITOCONDRIAS son uno de los orgnulos ms conspicuos del citoplasma y se encuentran en casi todas las clulas eucariticas. Observadas al microscopio electrnico de transmisin (M.E.T.), presentan una estructura caracterstica: la mitocondria tiene forma alargada u oval de 0,5 a 1 m de dimetro, y entre 1 m y varias micras de longitud y est envuelta por dos membranas distintas, una externa y otra interna (la que presentancrestas mitocondriales), muy replegada.Mitocondria vista con M.E.T.Las mitocondrias son los orgnulos celulares encargados de suministrar la mayor parte de la energa necesaria para la actividad celular, actan por tanto, comocentrales energticasde la clula y sintetizanATPa expensas de loscarburantes metablicos(glucosa, cidos grasos y aminocidos). Sin mitocondrias, los animales y hongos no seran capaces de utilizar oxgeno para extraer toda la energa de los alimentos y mantener con ella el crecimiento y la capacidad de reproducirse. Los organismos llamados anaerobios viven en medios sin oxgeno, y todos ellos carecen de mitocondrias.La ultraestructura mitocondrial est en relacin con las funciones que desempea: en la matriz se localizan los enzimas responsables de laoxidacinde los cidos grasos, los aminocidos, el cido pirvico y elciclo de krebs.IV- MATERIALES POR MESA:Muestra de: Aj amarillo (Xantofila)Hoja de Elodea (Cloroplastos)Clulas de epitelio bucalBetarraga (Antocianina) Papa (Amiloplastos)Zanahoria (caroteno) Cultivo de protozoarios BisturPinza en punta(observacin de lisosomas) Microscopios. Solucin Verde Janus 1/10,000Colorante Rojo neutroLaminas y laminillas Colorante Lugol Mecheros de alcoholHisoposGuantesV.PROCEDIMIENTO: A)OBSERVACION DE MITOCONDRIA EN EPITELIO BUCAL: 1.Con una lmina limpia y mediante un raspado suave obtener una muestra de la mucosa bucal, 2.Realizar un frotis extendiendo la muestra sobre otra lmina, 3.Dejar secar la lmina con la muestra al medio ambiente, 4.Cubrir la muestra con Verde Janus durante 5 minutos,5.Eliminar el exceso de colorante y dejar secar al medio ambiente, 6.Observar al microscopio con objetivos de 10x y 40xB)OBSERVACION DE LISOSOMAS en PROTOZOARIOS 1.Colocar en una lmina dos gotas cultivo de protozoarios y una gota del colorante rojo neutro, mezclar dejar reposar 2 minutos.. 2.Cubrir con una laminilla y observar el preparado a 10x y 40x . Visualizar en el interior de los Paramecium a los lisosomas . C).OBSERVACION DE PLASTIDOS EN VEGETALES: CLOROPLASTOS: Se localizan en las hojas debajo de la epidermis superior. 1.Seleccionar una hoja joven de Elodea, colocarla sobre una gota de agua en una lamina portaobjeto. 2.Cubrir la muestra con una laminilla. 3.Observar al microscopio con objetivo de menor y mayor aumento. CROMOPLASTOS: Son organelas coloreados y presentan formas variadas (redondas, elpticas, o aciculares). 1.Realizar cortes finos de zanahoria, aj amarillo, betarraga sobre una lmina portaobjetos 2.Colocar una gota de agua sobre el corte. 3.Cubrir con una laminilla. 4.Observar al microscopio con objetivos de menor y mayor aumento. AMILOPLASTO: Son organelas que contienen almidn como sustancia de reserva. 1.Sobre una lmina portaobjetos colocar una gota de Lugol. 2.Agregar un corte transversal fino de papa . 3.Cubrir con una laminilla. 4.Observar al microscopio con objetivo de menor y mayor aumento. VI.PROTOCOLO: VII.CONCLUSIONESVIII.CUESTIONARIO:1. Qu son las patologas mitocondriales?. Las enfermedades mitocondriales son el resultado del fracaso en el funcionamiento de las mitocondrias, a su vez, partes constitutivas de las clulas del organismo, cuya funcin es la de generar la energa necesaria para mantener la vida y para el desarrollo y correcta funcin de los rganos y sistemas. Cuando fallan, se genera cada vez menos energa en el interior de la clula, produciendo lesin o muerte celular. Si este proceso se repite en todo el cuerpo, los sistemas completos comienzan a fallar y la vida de la persona que lo sufre est en grave riesgo. Esta enfermedad afecta principalmente a los nios, pero los brotes en adultos se estn volviendo cada da ms frecuente. Las enfermedades de las mitocondrias parecen ocasionar el mayor dao a las clulas del cerebro corazn, hgado, msculo, rin, y a los sistemas endocrinos y respiratorios. Miopata mitocondrial sin afectacin ocular Oftalmopleja externa progresiva (OEP) Encefalomiopatas mitocondriales Sndrome de Kearns-Sayre (SKS) Epilepsia mioclnica con fibras rojo rasgadas (MERRF) Miopata mitocondrial con acidosis lctica y episodios similares a ictus (MELAS) Neuropata con ataxia y retinitis pigmentosa (NARP) Miopata con miocardiopata mitocondrial (MCM) Enfermedad de Leber Sndrome de Leigh2. Qu relacin tiene los lisosomas y la autofagia? Los Pre-lisosomas formadosde novoen elcitoplasmade una membrana en forma de copa se llaman phagophore.Los bordes del phagophore se expanden cada vez ms hasta alcanzar su forma ms esfrica, encerrando las piezas engullidas de citoplasma con lo que pudiera encontrarse dentro, y dando lugar a una vescula de doble membrana.Farquhar observ estas vesculas cerradas, que son conocidas como autofagosomas. Los autofagosomas toman las molculas daadas u orgnulos y llevan esa carga a los lisosomas.Cuando de Duve observ los autofagosomas, se dio cuenta de que las clulas podran degradar sus propios componentes y nombr al proceso autofagia .Por lo tanto podemos decir que la relacin que existe entre los ellos es que las dos van estar involucradas en proceso de descomposicin, eliminacin,reparacin de las organelas .3.Por qu las mitocondrias fijan el colorante verde de Janus?. Para evidenciar mitocondrias es utilizado Verde Jano al 0,01%. Este producto al reducirsevira del azul al verde brillante. Es un marcador especfico porque al colocarlo en presencia de mitocondrias, emplea en su reduccin los electrones de la cadena respiratoria que se encuentra emplazada en la membrana mitocondrial interna y las colorea de verde brillante.Las mitocondrias son teidas con el tinte Janus green B. Despus de la tincin, la mitocondria tie azul-verdosa, la cual es el color del tinte en su forma oxidada; en su forma reducida, el tinte es incoloro. ElJanus green se mantiene en estado oxidado por el sistema de oxidasa citocromo de la mitocondria.Esto sucede por la reaccin de oxidacin que sufre la mitocondria (especialmente su sistema decitocromo oxidasa), al contacto con el verde de Janus, que se es un colorante monoazoico que (en comparacin con el oxgeno del ambiente) tiende a oxidar especialmente a las mitocondrias debido a la gran cantidad de electrones presentes en ellas.4.Qu funcin cumplen los plastidios en las clula?. Los plastos, plstidos o plastidios son orgnulos celulares eucariticos, propios de las plantas y algas. Su funcin principal es la produccin y almacenamiento de importantes compuestos qumicos usados por la clula. Usualmente, contienen pigmentos utilizados en la fotosntesis, aunque el tipo de pigmento presente puede variar, determinando el color de la clula.IX.REFERENCIAS: qu funciones cumplen los plastidios?http://misdeberes.es/tarea/121728 http://respuestas.wikia.com/wiki/La_funcion_de_los_plastidios Verde de janushttp://www.buenastareas.com/ensayos/Verde-De-Janus/44239939.html https://espanol.answers.yahoo.com/question/index?qid=20070401112400AAFA8Nx PATOLOGAS MITOCONDRIALEShttp://www.aepmi.org/publico/patologias.php Los lisosomas y la autofagiahttps://cajalesygalileos.wordpress.com/2012/12/13/los-lisosomas-y-la-autofagia-scitable/ Organelashttp://elprofedebiolo.blogspot.com/2010/02/organelas.html Lisosomahttp://es.wikipedia.org/wiki/Lisosoma http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/La_celula/contenidos11.htm http://www.lookfordiagnosis.com/mesh_info.php?term=Lisosomas&lang=2 Cloroplastos y otro plastidioshttp://es.slideshare.net/sathycrlovehandel/cloroplastos-y-otro-plastidios Plastidioshttp://www.ecured.cu/index.php/Plastidios Mitocondriashttp://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/celular/mitocondria.html http://www.botanica.cnba.uba.ar/Pakete/3er/LaCelula/MITOCONDRIAS.htm Los lisosomas y la autofagiahttps://cajalesygalileos.wordpress.com/2012/12/13/los-lisosomas-y-la-autofagia-scitable/ Enfermedades mitocondrialeshttp://es.slideshare.net/JuFelipeRodriguezM/enfermedades-mitocondriales-9301307

Recommended

View more >