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9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 1 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM 9.- Caso prctico de Maternidad 9.1.- Se trataba de un supuesto de Filiacin en el que se solicitaba la investigacin de la maternidad biolgica de M 1 con respecto a dos individuos varones que dicen ser hijos suyos, donantes de M 2 y de M 3, respectivamente. ? M 1: sangre de mujer ? M 2: sangre de presunto hijo 1 ? M 3: sangre de presunto hijo 2 Podra la mujer donante de M 1 ser la madre biolgica del donante de M 2? Podra la mujer donante de M 1 ser la madre biolgica del donante de M 3? Precinto Respuesta M 2 Respuesta M3 Precinto Respuesta M 2 Respuesta M3 4589 NO S 507550NO S 4590 NO S 507551NO S 4591 NO S 507552NO S 4592 NO S 507553NO S 4595 NO S 507554NO S 4597 NO S 507555NO S 4598 NO S 507556NO S 4600 NO S 507559NO S 4601 NO S 507560NO S 4602 NO S 507561NO S 4604 NO S 507564NO S 4605 NO S 507565NO S 4606 NO S 507566NO S 4607 NO S 507568NO S 4608 NO S 507569NO S 4609 NO S 507571NO S 4610 NO S 507572NO S 4611 NO S 507573NO S 4614 NO S 507575NO S 4615 NO S 507576NO S 4617 NO S 507577NO S 4618 NO S 507579NO S 4619 NO S 507580NO S 4620 NO S 507581NO S 4621 NO S 507582NO S 4626 NO S 507601NO S 4627 NO S 507602NO S 4628 NO S 507603NO S 4629 NO S 507604NO S 4630 NO S 507605NO S 4631 NO S 507606NO S 4634 NO S 507610NO S 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 2 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM 4635 NO S 507612NO S 4636 NO S 507614NO S 4637 NO S 507616NO S 4638 NO S 507617NO S 4639 NO S 507618NO S 4640 NO S 507619NO S 4641 NO S 507620NO S 4642 NO S 507643NO S 4643 NO S 507644NO S 4644 NO S 507645NO S 4645 NO S 507646NO S 4646 NO S 507647NO S 4647 NO S 507648NO S 4648 NO S 507649NO S 4649 NO S 507675NO S 4650 NO S 507731NO S 4651 NO S 507732NO S 4652 NO S 507736NO S 4653 NO S 507737NO S 4654 NO S 507738NO S 4656 NO S 507739NO S 5980 NO S 507740NO S 9.2.- Conclusiones y observaciones del caso prctico de Maternidad Precinto Respuesta 4589 Com base nos 19 loci autossmicos analisados (tabela 7A): 1- A doadora da amostra M1 no pode ser excluda de ser a me biolgica do doador da amostra M3. Em todos os loci, pelo menos um dos alelos tipado em M3 encontra-se presente em M1. Utilizando o banco de dados de frequncias allicas do Laboratrio de Diagnsticos por DNA da UERJ, foi calculado um ndice de Maternidade de 31.136.253, que expressa uma probabilidade de 99,9999967 % a favor de M1 ser a me biolgica de M3. 2- A doadora da amostra M1 est excluda de ser a me biolgica do doador da amostra M2. Em nmero de loci superior a trs, nenhum dos alelos tipado em M2 verificado em M1. Com base nos 06 loci analisados em cromossomos sexuais X (tabela 7C): 1- A doadora da amostra M1 no pode ser excluda de ser a me biolgica do doador da amostra M3. Em todos os loci, o alelo tipado em M3 verificado em M1. 2- A doadora da amostra M1 est excluda de ser a me biolgica do doador da amostra M2. Em 05 loci do cromossomo X, o alelo tipado em M2 no est presente em M1. 4590 M2 e M3 comparten la misma lnea paterna. M1 es excluido de ser madre de M2 en los marcadores TH01;D18S51, PENTA E, CSF1PO, PENTA D, VWA, D8S1179, D2S1338, SE33, DXS8378, DXS7132, DXS10074, DXS10101,DXS10135. M1 no puede ser excluido de ser madre de M3 en los marcadores STRs autosomicos, en STRs del X y en ADN mitocondrial. 4591 Se excluye la maternidad de M1 con relacin a M2 por los STR D8S1179, vWA, D18S51, TH01, CSF1PO, D2S1338, Penta E y Penta D. 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 3 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM M2 y M3 comparten el mismo haplotipo STR de cromosoma Y. 4592 De acuerdo a los resultados obtenidos se informa que M2 no comparte con M1 6(seis) de los quince marcadores STRs investigados. Por lo tanto M1 queda excluida como madre biolgica de M2. De acuerdo a los resultados obtenidos se informa que M3 comparte con M1 el 50% de los alelos de los marcadores genticos STRs estudiados. De acuerdo al clculo matemtico-estadstico M1 tiene un Indice de Maternidad= 970650,5295 y una Probabilidad de Maternidad= 99,9999% con respecto a M3. Esto significa que M1 tiene una probabilidad del 99,9999% de ser la madre de M3, comparada con otra mujer tomada de la poblacin general en forma no seleccionada. Los perfiles de ADN nuclear autosmico obtenidos de las muestras M4 y M5 tampoco coinciden. Este resultado no es compatible con la hiptesis de que la muestra M5 pertenezca al donante de la muestra M4. 4597 Se observa compatibilidad entre M1 y M3 en todos loa marcadores probados, 20 STR autosmicos y 10 STR ligados al cromosoma X. Con respecto a M1 y M2 se observa incompatibilidad en 9 (D1S1656, D12S391, CSF1PO, TH01, VWA, D18S51, D8S1179, PENTA D y PENTA E) de los 20 STR autosmicos y en 8 (DXS8378, DXS9898, DXS7133, GATA172D05, DXS6809, DXS7132 y DXS9902) de los 10 STR ligados al cromosoma X. M2 y M3 comparten el mismo haplotipo del Cromosoma Y, muy posiblemente pertenecen al mismo linaje paterno. 4598 .- M2 Y M3 comparten patrilinea para los marcadores analizados. .- M2 queda excluido como hijo biologico de M1 por 9 marcadores : SE33, D1S1656, D12S391, CSFP01, TH01, VWA, D18S51, D2S1338, D8S1179. .- Es novecientos noventa y siete mil doscientos setenta (997270,0920) veces mas probable que la donante de la M1 sea la madre biologica del donante de M3 a que la madre biologica de M3 sea cualquier otra mujer al azar en la poblacion espaola. 4600 1- No puede excluirse el vinculo biologico de maternidad de M1 respecto de M3. 2- La Probabilidad de Maternidad es superior al 99,99% y el Indice de maternidad es de 55.100.000 4601 La muestra M2 present 6 discordancias con respecto a la muestra M1 entre los 15 marcadores STRs autosmicos analizados. Por lo tanto, no es necesario calcular el LR para determinar la probabilidad de maternidad. Se concluye que la mujer donante de la muestra M1 se excluye como madre biolgica del presunto hijo 1, donante de la muestra M2. La muestra M3 no present discordancias con respecto a M1 para ninguno de los 15 marcadores analizados. Se calcul el LR para M3 utilizando las siguientes hiptesis mutuamente excluyentes: H1: La mujer donante de M1 es la madre biolgica del individuo donante de M3 H0: La mujer donante de M1 no es la madre biolgica del individuo donante de M3 LR a priori = 0,5 LR= H1/H2 Utilizando las frecuencias allicas de la siguiente base de datos: Chiurillo et al. Forensic Sci Int. 2003 Sep 9; 136 (1-3): 99-101, se obtuvo un LR= 2201733,56183667 y una probabilidad de maternidad (W%)= 99,9999545812644. Por lo tanto se concluye que la mujer donante de la muestra M1 no puede ser excluida como madre biolgica del individuo donante de la muestra M3. 4602 En todos los sistemas investigados hay inclusin de vnculo biolgico entre el hijo M3 y la madre alegada M1. El ndice de Maternidad es IM=31000000, la probabilidad de que M3 sea hijo biolgico de M1 es del 99,99997 %. (los calculos se realizaron usando la base de datos de frecuencias allicas para la poblacin uruguaya) Los resultados de ADNmt obtenidos son concordantes con la conclusin anterior. Los resultados obtenidos en el anlisis de los marcadores genticos analizados permiten exluir a M2 como hijo biolgico de M1. 4604 M1-M2: En los marcadores D8S1179, CSF1PO, THO1, D2S1338 , VWA y D18S51 se observ incompatibilidad gentica entre M1 y M2 de acuerdo a lo que se espera para un vnculo madre/ hijo. El anlisis realizado de acuerdo a los resultados obtenidos excluye a M1 como progenitora posible de M2. M1-M3: En todas las comparaciones realizadas se observ compatibilidad gentica entre M1 y M3 de acuerdo a lo que se espera para un vinculo madre-hijo, por lo tanto los resultados obtenidos no permiten excluir a M1 como progenitora de M3. El Indice de Maternidad estimado fue de 5070498 y la Probabilidad de Maternidad estimada fue de 99,999980%. Se estima por lo tanto que resulta 5070498 veces ms probable que los resultados correspondan a la existencia de vnculo madre/hijo con respecto a que correspondan a dos individuos no relacionados Observacin: M2-M3: El haplotipo observados para los STR's del cromosoma Y analizados muestra coincidencia entre M2 y M3. La frecuencia del haplotipo mnimo para los marcadores ensayados se estima en 5.9126 E-4 (Fuente: 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 4 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM yhrd.org), lo que permite inferir que la frecuencia del haplotipo completo observado es mucho menor. De esta forma, los resulatdos proveen una fuerte evidencia a favor de la hiptesis que sostiene que ambos individuos pertenecen al mismo linaje paterno. 4605 La maternidad de M1 respecto de M2 se excluye en base al resultado obtenido para 6 marcadores de los 16 analizados, concretamente TH01, CSF1PO, VWA, D8S1179, D18S51, D2S1338. M1 no se puede excluir como madre biolgica de M3. La probabilidad de maternidad de M1 frente a M3 es de 99,999776% segn el resultado obtenido con el programa PATCAN. Atendiendo a los predicados verbales de Hummel, este resultado equivale a una maternidad prcticamente probada. No obstante, el anlisis de STR'Y realizado sobre las muestras M2 y M3 revela que comparten el mismo haplotipo para el cromosoma Y en los 16 marcadores analizados. Esto es indicativo de que M2 y M2 guardan algn tipo de parentesco por via paterna pudiendo ser hermanos o primos. 4606 Se excluye la maternidad de M1 en relacin a M2 ya que los perfiles muestran un total de 6 inconsistencias en los sistemas: D8S1179, CSF1P10, VWA, D28S51, TH01 y D2S1338. La informacin aportada por el ADN mitocondrial confirma el resultado obtenido a partir de los marcadores autosmicos. M1 posee un haplotipo distinto de M2, por tanto queda excluida la maternidad de M1 sobre M2. Los perfiles obtenidos con marcadores autosmicos para M1 y M3 son consistentes con la presunta maternidad de M1 sobre M3. As mismo son consistentes los haplotipos de M1 y M3 para las regiones estudiadas de ADN mitocondrial. Por lo tanto, M1 podra ser la madre biolgica de M3. 4607 La donante de M1 NO puede ser la madre biolgica del donante de M2 puesto que encontramos un elevado nmero de exclusiones (6). 4608 La donante de M1 SI puede ser la madre biolgica de M3. Segn los clculos, el LR resultante es de 351520.5235, lo que significa que es ms de 351520 veces ms probable que la donante de M1 sea la madre biolgica de M3, a que lo sea otra persona escogida al azar. Tomando una probabilidad a priori de 0.5, este resultado se puede traducir en una probabilidad de paternidad del 99.9997%. M1 Podria ser la madre biologica de M2: Se analizaron un total de 15 marcadores genticos y el marcador de sexo amelogenina. Segn se desprende de los datos reproducidos en la Tabla de Resultados adjunta, se observ incompatibilidad gentica en los siguientes marcadores THO1, D18S51, CSF1PO, VWA, D8S1179 y D2S1338. Los resultados obtenidos EXCLUYEN la existencia de vnculo biolgico de maternidad de la muestra con cdigo (M1) con respecto a la muestra cdigo (M2). Por lo tanto, la muestra M1 NO ES LA MADRE BIOL GICA de la muestra M2. M1 podria ser la madre biologica de M3. Se analizaron un total de 15 marcadores genticos y el marcador de sexo Amelogenina. Segn se desprende de los datos reproducidos en la Tabla de Resultados adjunta, en todas las comparaciones realizadas se observ la existencia de compatibilidad gentica entre la muestra con cdigo M1 y la muestra con cdigo m3. Los resultados obtenidos NO EXCLUYEN a la muestra con codigo M1 como posible Madre de la muestra con codigo M3. Los clculos realizados sobre la base de los resultados obtenidos indican una PROBABILIDAD DE MATERNIDAD (W) estimada de 99,999% y un NDICE DE MATERNIDAD estimado de 970774. Esto significa que resulta 970774 veces ms probable que la madre alegada sea la madre biolgica respecto de que lo fuera cualquier otro individuo de la poblacin general. 4609 Se descarta la relacin de maternidad biolgica entre las muestra M1 y M2 por incompatibilidad en los siguientes marcadores: S8S1179, CSF1PO, TH01, D2S1338, vWA, D18S51. No se detecta incompatibilidad gentica en ninguno de los marcadores estudiados para la muestra M1 con respecto a la muestra M3, por lo que no se puede descartar la relacin de maternidad biolgica. 4610 Concluso para M2 Em sete dos dezesseis loci estudados, os alelos encontrados no filho M2 no foram encontrados na susposta me M1 investigado. Conclumos, portanto, que M1 no me biolgica de M2. Concluso para M3 Identificaram-se alelos de dezesseis loci e a partir das freqncias destes alelos numa amostra representativa da populao brasileira e do clculo da combinao dos alelos nos periciados, verifica-se que o ndice de maternidade acumulado de 34.835.766. No se pde excluir a maternidade de M1 em relao ao filho M3 e o percentual de maternidade obtido foi de 99,99999%. 4611 M1 y M2 presentan 6 incompatibilidades para la hiptesis de maternidad planteada en los 15 marcadores analizados. Maternidad biolgica excluida. 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 5 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM M1 y M3 son compatibles para la hiptesis de maternidad planteada en los 15 marcadores analizados. IP=970773,82 W=99,999617% Maternidad Prcticamente Probada 4614 1. Maternidad M1 vs M2. Los genotipos obtenidos, mediante el estudio de 21 STRs autosmicos, NO son compatibles con que la donante de la muestra biolgica M1 sea la madre biolgica del donante de la muestra biolgica M2, ya que se han encontrado incompatibilidades en 7 de los 21 marcadores analizados. Estos resultados, por lo tanto, EXCLUYEN a la donante de la muestra biolgica M1 como madre biolgica del donante de la muestra biolgica M2 2. Maternidad M1 vs M3. Los genotipos obtenidos, mediante el estudio de 21 STRs autosmicos, son compatibles con que la donante de la muestra biolgica M1 sea la madre biolgica del donante de la muestra biolgica M3, por lo que estos resultados no permiten excluir la maternidad de la presunta madre. Se ha realizado el correspondiente anlisis estadstico de probabilidad e ndice de maternidad, utilizando una base de datos propia de poblacin espaolacon, los siguientes resultados: Probabilidad de Maternidad (a priori = 50%) > 99,999998% Indice de Maternidad (IM) = 93.292.176 La Probabilidad de Maternidad obtenida es superior a 99,99999%, valor que se encuentra dentro del rango considerado por K. Hummel y colaboradores como MATERNIDAD PRCTICAMENTE PROBADA. Del mismo modo, el valor del ndice de maternidad obtenido se corresponde, segn estos mismos autores, a una MATERNIDAD PRCTICAMENTE PROBADA. 3. Relacin de parentesco entre M2 y M3 El haplotipo de STRs del cromosoma Y obtenido del donante de la muestra biolgica M2 es totalmente coincidente con el haplotipo obtenido del donante de la muestra biolgica M3, lo que es compatible con que ambos individuos estn emparentados por va paterna. Se ha realizado una bsqueda de coincidencia de haplotipos en una base de datos pblica de haplotipos de STRs del cromosoma Y, sin encontrarse ninguna coincidencia en los 3561 haplotipos analizados. Esto significa que la probabilidad de coincidencia de haplotipos, suponiendo que los individuos analizados estn emparentados por va paterna, con respecto a que esta coincidencia se deba simplemente al azar (suponiendo una probabilidad a priori del 50%) es del 99,94%. 4617 A doadora da amostra M1 excluda de ser me biolgica do doador da amostra M2 por ter inconsistncias genticas nos seguintes locos autossmicos: D1S1656, D12S391, CSF1PO, TH01, VWA, D18S51, D2S1338, D8S1179, Penta D, Penta E, D19S253, D10S1237, D1S1171, D9S1118. Alm disso, o hapltipo do cromossomo X da doadora da amostra M1 diferente daquele do doador da amostra M2, excluindo o vnculo gentico entre eles. O doador da amostra M1 possui o mesmo hapltipo de mtDNA que o doador da amostra M3, e portanto eles podem compartilhar a mesma linha matrilinear. A doadora da amostra M1 no pde ser excluda de ser me biolgica do doador da amostra M3. Usando as frequncias allicas locais calculamos que o ndice de maternidade da doadora de M1 em relao ao doador de M3 6478143, o que leva a uma probabilidade de maternidade >99,99%, usando uma probabilidade a priori de 0,5. O doador da amostra M3 compartilha todos os alelos dos locos do cromossomo X estudados com os da doadora da amostra M1, sugerindo que eles compartilham o mesmo cromossomo X, reforando a tese de que existe vnculo gentico entre eles. O doador da amostra M1 no possui o mesmo hapltipo de mtDNA que o doador da amostra M2, e portanto eles no compartilham a mesma linha matrilinear. Os doadores das amostras M2 e M3 possuem o mesmo hapltipo do cromossomo Y; isto sugere que eles compartilham a mesma linha patrilinear, e que eles so irmos biolgicos por parte de pai. No foi calculado um ndice de meio-irmandade nesta ocasio. 4618 As amostras M1, M2 e M3 foram submetidas a procedimentos de extrao de DNA e amplificao pelo mtodo da PCR para os seguintes marcadores genticos STR autossmicos: D8S1179, D21S11, D7S820, CSF1PO, D3S1358, TH01, D13S317, D16S539, D2S1338, D19S433, vWA, TPOX, D18S51, D5S818, FGA, Penta D e Penta E. Os produtos de amplificao foram submetidos a eletroforese capilar e os perfis genticos obtidos, analisados por deteco por fluorescncia. As anlises dos resultados demonstram que: 4618 1. O perfil gentico da amostra M1 no apresenta alelos em comum com o perfil da amostra M2 nos loci CSF1PO, TH01, vWA, D18S51, D2S1338, D8S1179, Penta D e Penta E, caracterizando excluso de vnculo gentico de maternidade. 2. Os perfis genticos obtidos das amostras M1 e M3 demonstram que ambas compartilham ao menos um 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 6 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM alelo em cada loco analisado, estabelecendo a condio de vnculo gentico de maternidade. As amostras M2 e M3 foram submetidas a amplificao pela PCR para os seguintes marcadores STR do cromossomo Y: DYS456, DYS389I, DYS390, DYS389II, DYS458, DYS19, DYS385, DYS393, DYS391, DYS439, DYS635, DYS392, GATA_H4, DYS437, DYS438 e DYS448. Os resultados demonstraram que ambas as amostras apresentam um mesmo hapltipo, no se excluindo a possibilidade dos doadores compartilharem a mesma linhagem patrilnea. 4619 RESULTADOS: 1.Los resultados obtenidos mediante el anlisis de STRs autosmicos muestran exclusin de la mujer donante de la muestra M1 como madre biolgica del donante de M2, ya que presenta 4 exclusiones de primer orden(D8S1179,CSF1PO,vWA,D18S51) y 2 de segundo orden(THO1,D2S1338). 2.Los resultados obtenidos mediante el anlisis de STRs autosmicos de las muestra M1 y M3 no presentan ninguna exclusin , por lo que M1 podra ser la madre biolgica de M3. ANLISIS ESTADSTICO DE M1 RESPECTO A M2: Predicado verbal (Hummel): Exclusin de Maternidad CONCLUSIONES Primera: El estudio de los diversos marcadores genticos moleculares utilizados han permitido excluir a M1 como madre biolgica de M2. Segunda: El anlisis estadstico de la probabilidad de maternidad de la muestra M1 ha concedido una EXCLUSI N DE MATERNIDAD basada en 4 exclusiones de primer orden y 2 de segundo orden. ANLISIS ESTADSTICO DE M1 RESPECTO A M3: Valor de X= 0,001953125 Valor de Y= 1,034577253x10-9 Probabilidad de Maternidad (W)= 99,999947% Predicado verbal (Hummel): Maternidad prcticamente probada CONCLUSIONES Primera: El estudio de los diversos marcadores genticos moleculares utilizados no han permitido excluir a M1 como madre de M3. Segunda: El anlisis estadstico de la probabilidad de maternidad de la muestra de M1 teniendo en cuenta la estructura genotpica de la presunta madre(valor de X) y la distribucin de los distintos marcadores analizados en la poblacin (valor de Y), ha concedido una probabilidad de maternidad del 99,999947% respecto a M3 , que corresponde a una maternidad prcticamente probada. 4620 Atendiendo a los resultados genticos obtenidos se llevan a cabo las siguientes conclusiones: 1.- CONCLUSION DE M1 CON RESPECTO A M2 La muestra M1 se excluye como perteneciente a la madre biolgica del individuo donante de la muestra M2 2.- CONCLUSION DE M1 CON RESPECTO A M3 2.1.- La muestra M1 no puede ser excluida como perteneciente a la madre biolgica del individuo donante de la muestra M3 2.2.- El indice de maternidad del individuo donante de la muestra M1 con respecto al individuo donante de la muestra M3 es de 970773,82. (Probabilidad de maternidad de 99,999896 considerando una probabilidad a priori de 0.5) OBSERVACIONES Se han utilizado la tabla de frecuencias suministrada 4621 1- Basados en el anlisis de los resultados obtenidos de los marcadores de cromsoma Y analizados no puede excluirse el vnculo biolgico por va paterna entre los individuos a los que pertenecen las muestras "M2" y "M3". 2-Basados en el anlisis de los resultados obtenidos de 15 loci STRs autosmicos, 10 STRs de cromosoma X y de la regin HVI del ADN mitocondrial, la mujer a quien pertenece la muestra "M1" queda excluida de la maternidad biolgica con respecto al individuo al que pertenece la muestra "M2". 3- Basados en el anlisis de los resultados obtenidos de 15 loci STRs autosmicos, 10 STRs de cromosoma X y de la regin HVI del ADN mitocondrial, no puede excluirse a la mujer a quien pertenece la muestra "M1" de la maternidad biolgica con respecto al individuo al que pertenece la muestra "M3". 4- La secuencia de ADN mitocondrial obtenida de "M1" y "M3" no presenta diferencias con la secuencia de referencia CRS en la regin estudiadada encontrndose 298 veces sobre un total de 4839 perfiles (0.0616) en la base de datos forense del FBI con la siguiente distribucin: Grupo de Origen Africano: 14/1305 (0.0107); Grupo de origen caucsico: 270/1674 (0.1613); Grupo de Origen Hispnico: 11/686 (0.0160); Grupo de Origen Asiatico: 3/848 (0.0035). 5- Basados en el anlisis de los resultados obtenidos de 15 loci STRs autosmicos la mujer a quien pertenece 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 7 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM la muestra "M1" presenta un ndice de Maternidad de 30.084.503,8030 y una Probabilidad de Maternidad de 99.99999% con respecto al individuo al que pertenece la muestra "M3". (NOTA: Se realizaron los clculos solo en forma ilustrativa utilizando una base de datos local). 4626 Respecto de M3, los valores del indice de maternidad y la probabilidad para una P "a priori" de 0,5, son: IM=11905555 W=99,9999916 % Los resultados de STR autosmicos, X-STR y ADNmt descartan que M1 pueda ser madre de M2. No obstante, M2 y M3 podran ser hijos del mismo padre. 4627 IP = 21615395,8772 W = 99,999995 % Programa Familias versin 1.63 Clculos efectuados para Identifiler, Penta D y Penta E usando la base de datos del INTCF de Madrid 4628 I- Dadas as ausncias de correspondncias allicas observadas nas regies TH01, CSF1PO, VWA, D8S1179, D18S51 e D2S1338 conclui-se pela condio de excluso de maternidade entre M1 e M2 II- Dadas as correspondncias allicas verificas na 15 regies analisadas e ao ndice de maternidade alcanado (716.119,36), conclui-se pela condio de incluso de maternidade entre M1 e M3, com uma probabilidade de 99,99986% 4629 Conclui-se que M1 pode ser me biolgica de M3 com um indce de maternidade de 9059870,998 que corresponde a uma probabilidade de 99,9999%. 4630 O conjunto de resultados obtidos permite concluir que a probabilidade de M1 ser a me biolgica de M2 praticamente nula. De facto, a ausncia dos produtos dos genes CSF1PO*11 ou CSF1PO*12, D2S1338*20, D8S1179*12 ou D8S1179*13, D18S51*16 ou D18S51*25, PD*11 ou PD*12, PE*12 ou PE*18, TH01*8 e VWA*15 ou VWA*20 em M2, s seria compatvel com a hiptese de maternidade em causa, invocando a ocorrncia de fenmenos por si raros e cuja conjugao simultnea seria, em termos prticos, impossvel. O conjunto de resultados obtidos permite concluir que a hiptese de M1 ser a me biolgica de M3 878680390,8353 vezes mais provvel que a hiptese contrria de no maternidade (W = 99,999999989%). 4631 SE EXCLUYE LA MATERNIDAD DE M1 CON RESPECTO A M2 POR EXISTIR EXCLUSIONES EN LOS SIGUIENTES SISTEMAS: D8S1179, CSF1PO, TH01, D2S1338, vWA, D18S51. ES COMPATIBLE LA MATERNIDAD DE M1 CON RESPECTO A M3 CON UN IP TOTAL DE 970.774 Y UN W DE 99,9999%. 4634 No estudo da maternidade de M1 sobre M2 foram analisados 15 marcadores (utilizamos os mesmos marcadores para os quais nos foi concedida a frequencia dos alelos) e foram observadas 6 excluses. Portanto, a mulher doadora de M1 no a me biolgica do indivduo representado por M2. No estudo da maternidade de M1 sobre M3 concluimos que a mulher doadora de M1 a me biolgica do indivduo representado por M3. Com a anlise dos 15 marcadores (utilizamos as frequncias que foram concedidas ao laboratrio) atingimos uma probabilidade de maternidade de 99,9998%, IPC: 624.307:1, PET: 99,98%. 4635 CONCLUSION 1.- La mujer donante de M 1 se excluye como madre biolgica del donante de M 2. CONCLUSION 2.- La mujer donante de M 1 no se excluye como madre biolgica del donante de M 3. 4637 M1 NO podra ser la madre biolgica de M2, pues 6 de los marcadores autosmicos analizados excluyen esa posibilidad. M2 SI podra ser la madre biolgica de M3. La razn de probabilidad es de 970773,82, que corresponde, para una probabilidad a priori del 50%, a una probabilidad del 99,99990%. 4639 M2 y M3 pertencem a la misma familia masculina, tendo em vista el haplotipo del cromossomo Y apresentar-se identico. Analisando el banco de dados del Y ( http://www.yhrd.org/index.html), encontramos solamente 9 personas com los mismos marcadores DYS19, DYS389I, DYS389II, DYS390, DYS391, DYS392, DYS393, DYS385, DYS438 y DYS439, entre 23.073 haplotipos. 9 en Europa, 2 en America Latina, 1 en los EUA. Aconteceram exclusiones de maternidad para o presunto hijo 1 nos locos: TH01, D2S1338, D8S1179,CSF1PO, vWA31, D18S51 e PENTA D. Desta maneira fica excluda la maternidad para esse hijo. En relacion a hijo 2, encontramos alelos en comun entre la madre e el suposto hijo em todos los locos analisados. El indice de cumulativo de paternidad foi de 59.000.000 e la probabilidad cumulativa de paternidad 99,999998%. 4640 Mediante amplificacion y comparacin de marcadores genmicos (AmpFlSTR Identifiler) se puede concluir que M1 es madre de M3 y no lo es de M2. Esta conclusin se corrobora por 2 anlisis complementarios: 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 8 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM Haplotipos del ADN mitocondrial : se establece la identidad entre M1 y M3 , teniendo M2 un haplotipo mitocondrial diferente de M1 Marcadores del cromosoma X: se establece compatibilidad entre M1 y M3 , descartando compatibilidad entre M1 y M2 Entre M2 y M3 se han analizado los marcadores del cromosoma Y determinando la identidad entre ambos varones lo que indica relacin de parentesco va paterna. 4641 1. Los resultados obtenidos en el anlisis de polimorfismos de ADN (ver tablas) permiten excluir al parental M 1 como madre biolgica de M 2 (exclusin para los sistemas: D8S1179, CSF1PO, TH01, D2S1338, VWA, D18S551, PENTA D y PENTA E). 2. Los resultados obtenidos en el anlisis de polimorfismos de ADN (ver tablas) no permiten excluir al parental M 1 como madre biolgica de M 3 ya que se comprueba para todos los polimorfismos de ADN analizados la herencia de un alelo materno procedente de M 1. Se ha procedido por tanto al calculo de la probabilidad de maternidad e ndice de maternidad, obtenindose los siguientes valores: PROBABILIDAD DE MATERNIDAD (W) = 99,999995% INDICE DE MATERNIDAD (IM) = 21615396:1 3. Se comprueba que la donante de M 1 y M 3 presentan el mismo haplotipo de ADN mitocondrial (regiones HV1 Y HV2) no habindose computado estos marcadores en el calculo de W e IM. Estos donantes presentan un haplotipo ADN mitocondrial diferente del obtenido para el donante de M 2. 4. Por otro lado, se comprueba que los donantes de M 2 y M 3 presentan el mismo haplotipo de cromosoma Y. 4642 CONCLUSIONES 1-Los resultados obtenidos indican la existencia de vnculo biolgico de maternidad de M1 respecto de M3, con un Indice de Maternidad de: IM= 9707347,5580 y una probabilidad de maternidad superior al 99,99%. 2-Los resultados obtenidos excluyen el vnculo biolgico de maternidad de M1 respecto de M2. 3-Los resultados de cromosoma X permiten confirmar las conclusiones planteadas en los puntos 1 y 2. 4- El anlisis de ADN mitocondrial indica la pertenencia a la misma matrilnea de M1 y M3 y excluye a M2 como perteneciente a la misma. 5-El anlisis de marcadores de cromosoma Y indican que M2 y M3 perteneceran a una misma patrilnea (la frecuencia del haplotipo en la poblacin mundial es 0.000175 ). Nota: los clculos se realizaron empleando la base de datos del ejercicio de control de calidad GEP. Los sistemas Penta E y Penta D no fueron incluidos en el clculo por no estar incluidas sus frecuencias en la documentacin del ejercicio 2007. La frecuencia del haplotipo de cromosoma Y corresponde a la base de datos mundial www.yhrd.org. Los marcadores de cromosoma X no fueron includos en el clculo por no disponerse an de una base de datos de referencia. 4643 No se excluye la relacin biolgica de maternidad entre M-1 y M-3, obtenindose un ndice de Maternidad ponderado de 398.083,9236 y una probabilidad de maternidad ponderada del 99,9997%, que es considerada como "maternidad prcticamente probada". Se excluye la relacin biolgica de maternidad entre M-1 y M-2. 4644 En los 17 STRs autosmicos analizados, se han detectado 8 incompatibilidades (D8S1179, CSF1PO, TH01, D2S1338, VWA, D18S51, PENTA E y PENTA D) para una relacin materno-filial de M1 respecto de M2. Los haplotipos de ADN mitocondrial de M1 y M2 son distintos, por lo que puede descartarse que entre M1 y M2 exista una relacin de parentesco por va materna. Los haplotipos de ADN mitocondrial de M1 y M3 coinciden entre s, por lo que no puede descartarse que entre los donantes de M1 y M3 exista una relacin de parentesco por va materna. 4645 Entre los marcadores autosmicos de M1 y M2 se observan 6 inconsistencias, lo que permite excluir a M1 como madre biolgica de M2. En los STRs autosmicos de M1 y M3 no se observan inconsistencias, por lo que no se puede excluir a M1 como madre biolgica de M3. Calculando el ndice de maternidad se obtiene un LR acumulado de 970.774, lo que corresponde a una probabilidad de maternidad del 99,9999%, es decir maternidad prcticamente probada segn los predicados de Hummel. Los resultados obtenidos en los marcadores del cromosoma X y ADN mitocondrial tambin apoyan esta hiptesis, aunque no han sido tenidos en cuenta para el clculo del ndice de maternidad. 4646 A partir de los resultados obtenidos en los sistemas D8S1179, CSF1PO, THO1, D2S1338, vWA, D18S51, Penta E y Penta D se excluye a M1 como madre biolgica de M2. A partir de los resultados obtenidos en todos los sistemas analizados, no es posible excluir a M1 como madre biolgica de M3. Los clculos estadsticos realizados indican un Indice de Maternidad de 290.044.260 y una probabilidad de Maternidad de 99,9999997 % 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 9 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM 4647 M1 no se excluye como la madre biolgica de M3 M1 se excluye como la madre biolgica de M2 encontrandose 9 exclusiones en los sistemas D1S1656, D12S391, CSF1PO, TH01, vWA, D18S51, D8S1179, PENTA D Y PENTA E. 4648 M2 no puede ser hijo biolgico de M1 dado que al acomparar ambos perfiles de identidad se observan 7 discordancias allicas entre ellos. M1, no puede ser excluda como madre biolgica de M3, dado que para un conjunto de 15 marcadores, se observa concordancia allica para todos ellos. La Probabilidad de maternidad de M1 con respecto a M3 se ha estimado en 99,9999 % 4649 SUPUESTO: M1 MADRE DE M2.- El estudio de los diversos marcadores gentico moleculares utilizados ha puesto de manifiesto 8 exclusiones de Maternidad en los sistemas CSF1P0, TH01, vWA, D18S51, D2S1338, D8S1179, PENTA D y PENTA E, por lo que se puede excluir a la donante de la muestra M1 como madre de la Muestra M2. mt-DNA.- El mt-DNA de la donante de la muestra M1 es incompatible con el donante de la muestra M2. SUPUESTO M1 MADRE DE M3.- ANLISIS ESTADSTICO.- Se ha utilizado siempre para el clculo estadstico una probabilidad "a priori" del 0.5. Indice de Maternidad (IM) = 51393138,3041 Probabilidad de Maternidad (W) = 99,999998 % CONCLUSIONES Primera: El estudio de los diversos marcadores gentico moleculares utilizados no ha permitido excluir a la muestra M1 como madre biolgica de M3. Segunda: El ndice de maternidad que establece la probabilidad de la evidencia dado que la donante de la muestra M1 es la madre biolgica del donante de la muestra M3, en comparacin con la hiptesis alternativa de que la donante de la muestra M1 no es la madre biolgica del donante de la muestra M3 es de 51393138,3041. En trminos porcentuales, el valor de la probabilidad para la hiptesis de que la donante de la muestra M1 es la madre biolgica del donante de la muestra M3 es de 99,999998% (a priori de 0,5). mt-DNA.- La donante de la muestra M1 es compatible con la maternidad del donante de la muestra M3 4650 El anlisis de 17 STRs autosmicos nos permite descartar a M1 como madre de M2 al encontrar 8 incompatibilidades con esta hiptesis. El anlisis de las secuencias de HVI y HVII de ADN mitocondrial confirman que no existe vfiliacin materna entre las muestras. El anlisis de los 17 STRs da como resultado la compatibilidad de M1 como madre de M3, resultado que confirma el anlisis de las secuencias del ADN mitocondrial (son secuencias idnticas). El clculo del ndice de Maternidad para los marcadores D8S1179, D21S11, D7S820, CSF1PO, D3S1358, TH01, D13S317, D16S539, D2S1338, D19S433, vWA, TPOX, D18S51, D5S818 y FGA, da un valor de IM=1108140, y un W=0.9999991. Para el clculo del ndice de maternidad del marcador D18S51 se ha utilizado la frecuencia mnima correspondiente para el alelo 25, ausente en la poblacin de referencia. El anlisis del cromosoma Y para las muestras M2 y M3 nos indica que son medio hermanos por parte de padre o, en cualquier caso, que estn emparentados por va paterna. 4652 M1 es excluida de la maternidad de M2: - en los STRs autosomicos D8S1179, CSF1PO, TH01, D2S1338, vWA, D18S51, Penta E, Penta D, D1S1656, D12S391 y SE33 - en los STRs de cromosoma X DXS8378, DXS9898, DXS7133, GATA31E08, GATA172D05, DXS6809, DXS7132, DXS10074, DXS10101 Y DXS10135 - en el ADN mitocondrial M1 no puede ser excluida de la maternidad de M3 ni en los STRs nucleares ni en el ADN mitocondrial. 4653 Conclusiones para M3: 1.Los resultados obtenidos con los marcadores estudiados indican que M1 no se puede excluir como madre biolgica de M3. De acuerdo al haplotipo de ADN mitocondrial, M1 y M3 comparten matrilnea. M1 y M3 comparten un haplotipo de X STR. 2.ndice de Maternidad (IM) calculado con marcadores STR autosmicos. IM = 11.075.576 El valor de IM obtenido implica que los perfiles genticos hallados son 11.075.576 veces ms probables si M1 es la madre biolgica de M3 que una persona de la poblacin al azar. 3.Probabilidad de Maternidad (Expresin porcentual del IM) PM = 99,99999% La probabilidad que M1 sea la madre biolgica de M3 es del 99,99999%. 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 10 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM Conclusiones para M2: 1.Los perfiles genticos hallados en M1 y M2 presentan inconsistencias para la hiptesis planteada (M1 es la madre biolgica de M2) e indican EXCLUSI N de la maternidad biolgica de M1 sobre M2. 2.La supuesta madre M1 ES EXCLUDA COMO MADRE BIOL GICA de M2. 4654 La muestra M3 puede ser el hijo biolgico de la muestra M1 ya que tanto el ADN mitocondrial como los STRs son compatibles. La muestra M2 no puede ser el hijo biolgico de la muestra M1. El ADN mitocondrial es incompatible ya que las dos muestras difieren en 4 posiciones para la regin I de la regin de control y en 4 posiciones para la regin II. Adems, 6 de los 15 STRs autosmicos analizados (CSF1PO, TH01, vWA, D18S51, D2S1338 y D8S1179) son incompatibles. No obstante, las muestras M2 y M3 pueden compartir la lnea paterna, ya que comparten el mismo haplotipo de 16 STRs del cromosoma Y. 4656 M1 no puede ser la madre biolgica de M2 ya que presenta 7 EXCLUSIONES. Mientras que M1 si puede ser la madre biolgica de M3 con un Indice de Paternidad de 4154925 y una probalidad de paternidad de 99,9999 % (considerando una probabilidad a piori del 50%) 5980 1. Las secuencias HVR1 y HVR2 de las muestras M1 (madre biolgica) y M3 (presunto hijo 2) son coincidentes entre s. El valor de LR obtenido es de 106,5, lo que indica que la coincidencia debida a la pertenencia a un mismo linaje matrilineal es 106,5 veces mayor que la coincidencia debido al azar en la poblacin de referencia utilizada (2341 individuos caucasoides e hispanos recogidos en la base de datos del FBI). 2. No se observa exclusin de la maternidad biolgica de M1 con respecto a M3 en ninguno de los marcadores nucleares analizados. 3. El anlisis estadstico de la probabilidad de maternidad, teniendo en cuenta la estructura genotpica de la supuesta madre y las distribuciones allicas de los marcadores analizados, ha proporcionado una Probabilidad de Maternidad de M1 con respecto a M3 de 99,999915 % y un ndice de Maternidad de 1.175.103,5955. Por tanto, es 1.175.103,5955 veces ms probable que M1 y M3 tengan los perfiles obtenidos si M1 es madre de M3, que si no estuvieran emparentados. 4.Las secuencias HVR1 y HVR2 de las muestras M1 (madre biolgica) y M2 (presunto hijo 1) NO son coincidentes. Esto significa que no pertenecen a un mismo linaje matrilineal. 5. M1 muestra exclusin de la maternidad biolgica con respecto a M2 en seis de los marcadores nucleares autosmicos analizados: D8S1179, CSF1PO, TH01, D2S1338, VWA y D18S51. 6. Los resultados anteriores permiten excluir a M1 como madre biolgica de M2. 507550 Atravs da anlise dos resultados obtidos para os 15 marcadores STRs estudados nas amostras de M1 e M2 foi possivel atravs dos marcadores: D8S1179, CSF1PO, TH01, D2S1338, vWA e D18S51 excluir M1 da maternidade biolgica de M2. Pelo contrrio, atravs da anlise dos resultados obtidos para os 15 marcadores STRs estudados nas amostras de M1 e M3 podemos concluir que M1 no excludo da maternidade de M3 j que em ambas as amostras existe um alelo comum de cada um dos marcadores estudados. 507551 Os gentipos obtidos pela anlise de 15 STRs autossmicos das amostras M1, M2 e M3 so compatveis com que M1 seja a me biolgica de M3, obtendo-se um ndice de paternidade (IP) de 970773,8211, utilizando as frequncias allicas fornecidas pelo GEP, o que corresponde (considerando uma probabilidade priori de 0.5) a uma probabilidade de paternidade superior a 99,9998%. Os gentipos obtidos pela anlise de 15 STRs autossmicos das amostras M1, M2 e M3 permitem excluir M1 como me biolgica de M2. Encontramos incompatibilidades em seis dos marcadores utilizados (D8S1179, CSF1PO, TH01, D2S1338, vWA e D18S51). 507552 Em material gentico (DNA) extrado de amostras sanguneas dos indivduos M1, M2 e M3 identificaram-se alelos de quinze microssatlites. Em relao ao suposto filho M2, houve excluso em seis loci (TH01, CSF1PO, vWA, D8S1179, D18S51, D2S1338), do total de quinze loci analisados. Em relao ao suposto filho M3, nos quinze loci analisados, um dos alelos encontrados na me estava tambm presente no suposto filho M3. A partir das freqncias desses alelos numa amostra representativa da populao em questo (tabela enviada no exerccio_2007), verifica-se que o ndice de maternidade acumulado de 97.077.382,11. Conclumos, portanto que : M1 no a me biolgica de M2. M1 a me biolgica de M3 com probabilidade de maternidade maior do que 99,99 por cento, ou seja 99,99999897. 507553 M2 apresenta 6 loci que no com alelos que no poderiam ter sido herdados de M1. Assim, aps anlise estatstica, com uso do programa Familias, obtivemos um Likelihood de 3,79364977910587E-63. Concluindo: M1 pode ser excluda como me biolgica de M2. 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 11 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM M3 apresenta em todos os loci investigados um alelo que pode ter sido herdado de M1. Aps anlise estatstica M1 no pode ser excluda como me biolgica de M3, apresentando um Likelihood de 1,39010732191142E-56 com probabilidade de 99,9999727. 507554 A) Los resultados indican que M1 queda excluida como madre biolgica de M2. B) La totalidad de los resultados indican que el M1 no puede ser excluida como madre biolgica de M3. Indice de Maternidad: 26.383 (con frecuencias poblacionales locales) % PM: 99,996% 507555 Tras el estudio de los STRs nucleares (17 marcadores) se han observado 8 exclusiones de M1 respecto a M2, por lo que se puede descartar, sin lugar a dudas, que M1 sea la madre biolgica de M2. Las exclusiones se han observado en los marcadores CSF1PO, TH01, vWA, D18S51, D2S1338, D8S1179, Penta D i Penta E, donde el supuesto hijo no presenta ningn alelo que, de forma obligada, tendra que haberle transmitido la madre. El estudio de ADN mitocondrial en este caso tambin nos permite descartar a M2 como supuesto hijo de M1 En el caso de M1 respecto de M3, no se ha observado ninguna exclusin. Y, dados los genotipos observados, es 84.636.506,1502 veces ms probable que M1 sea la madre biolgica de M3, respecto a que lo sea otra mujer de la poblacin escogida al azar (IM=84.636.506,1502; probabilidad de maternidad=99,9999988%). Segn los predicados verbales de Hummel se puede considerar la maternidad de M1 sobre M3 practicamente probada. Las secuencias de mtDNA de las muestras M1 y M3 coinciden, apoyando los resultados encontrados en los marcadores autosmicos. 507556 Los resultados muestran que M1 no puede ser la madre biolgica de M2, el anlisis de los STRs presenta 6 exclusiones en los sistemas: CSF1PO, TH01, VWA, D18S51, D2S1338 y D8S1179. En el caso de M1 y el presunto hijo M3, M1 no puede ser excluida como madre biolgica, observandose compatibilidad gentica en la comparacin de todos los sistemas estudiados, calculndose por tanto el ndice y la Probabilidad de Maternidad. El ndice de Maternidad es de 971.015,3907, la Probabilidad de maternidad es de 99,9998970 %. 507559 1) Os resultados obtidos nos locos CSF1PO, D1S1656, D2S1338, D8S1179, D12S391, D18S51, PentaD, PentaE, SE33, TH01 e VWA no so compatveis com a maternidade biolgica de M1 com relao a M2. 2) Os resultados obtidos permitem calcular um ndice de Maternidade de 262442362,6 de M1 com relao a M3. Assumindo uma probabilidade a priori de 0,5 podemos calcular uma Probabilidade Posterior de Maternidade de 99,9999996% de M1 com relao a M3. 3) M2 e M3 apresentam um perfil idntico de microssatlites do cromossomo Y, sugerindo que eles pertencem mesma patrilinhagem. Examinamos a possibilidade de M2 e M3 serem meio-irmos por parte de pai. O ndice de meia-irmandade foi de 8,7578. Assumindo uma probabilidade a priori de 0,5 podemos calcular uma Probabilidade de Meia-Irmandade de 89,7518%. 507560 M1 SE EXCLUYE COMO MADRE BIOLOGICA DE M2 YA QUE EN 16 STRs AUTOSOMICOS ANALIZADOS ENCONTRAMOS 8 INCOMPATIBLIDADES . M1 PUEDE SER LA MADRE BIOLOGICA DE M3 YA QWU DESPUES DE ANALIZAR 16 STRs AUTOSOMICOS ANALIZADOS NO ENCONTRAMOS INCOMPATIBLIDADES Y ENCONTRAMOS UN IM( INDICE DE MATERNIDAD) DE 2003250 . Y UN W DE 99.9999% 507561 CONCLUSI N DE M1 CON RELACI N A M2: OBTENIDOS LOS TIPAJES GENTICOS DE LAS MUESTRAS ANALIZADAS, SE CONCLUYE QUE M1 SE EXCLUYE COMO MADRE BIOL GICA DE M2. SE OBSERV EXCLUSI N EN 7 DE 19 STRs. CONCLUSI N DE M1 CON RELACI N A M3: OBTENIDOS LOS TIPAJES GENTICOS DE LAS MUESTRAS ANALIZADAS, SE CONCLUYE QUE M1 NO SE PUEDE EXCLUIR COMO MADRE BIOL GICA DE M3 EN 19 STRs, ENCONTRNDOSE UN NDICE DE PATERNIDAD ACUMULADO DE 23'940.981 Y UNA PROBABILIDAD DE PATERNIDAD DE 99,999996%. 507564 Prueba de maternidad respecto a M2: Los resultados obtenidos en el anlisis de los 17 polimorfismos STR anteriormente indicados, descartan que la persona donante de la muestra M1 sea madre de la persona donante de la muestra M2. En 5 de los 17 polimorfismos, las personas donantes de las muestras M1 y M2 no comparten variantes polimrficas. Este resultado es incompatible con una relacin biolgica madre-hijo. Los polimorfismos concretos que descartan la maternidad son: CSF1PO, TH01, VWA, D18S51 y D8S1179. Prueba de maternidad respecto a M3: Los resultados obtenidos en el anlisis de los 17 polimorfismos STR anteriormente indicados, no excluyen a la persona donante de la muestra M1 como madre de la persona donante de la muestra M3, ya que en cada uno de los 17 polimorfismos analizados, se ha comprobado que comparten al menos una de las dos variantes, tal como se espera cuando existe una relacin biolgica madre-hijo. 507565 M1 SE EXCLUYE COMO MADRE BIOLOGICA DE M2 POR LOS MARCADORES: CSF1PO, D18S51, D8S1179, TH01, 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 12 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM vWA,D2S1338, Y D19S433. LA PROBABILIDAD DE MATERNIDAD ES DE 99,99995 M1 TIENE 2.201.733,5618 VECES MAS PROBABILIDAD DE SER LA MADRE DE M3 QUE CUALQUIER MUJER VENEZOLANA AL AZAR. M1 NO PUEDE SER EXCLUIDA COMO LA MADRE BIOLOGICA DE M3 BASE DE DATOS: M.A. Chiurillo et al. Forensic science international 136 (2033) 99-101 507566 El patrn gentico de M1 no es compatible con que sea la madre biolgica de M2. Se observan seis no coincidencias. El patrn gentico de M1 es compatible con que sea la madre biolgica de M3, obtenindose una probabilidad de maternidad del 99.999999924%. 507568 Podra la mujer donante de M1 ser la madre biolgica del donante de M2? Los resultados obtenidos a travs de los perfiles genticos, muestran la exclusin de M1 como madre biolgica de M2 en ocho de los marcadores genticos analizados. Una vez ponderados los resultados y considerando la existencia de exclusin en ms de tres sistemas genticos, se concluye que M1 no es la madre biolgica de M2. Podra la mujer donante de M1 ser la madre biolgica del donante de M3? Los resultados obtenidos a travs de los perfiles genticos, no muestran exclusin de M1 como madre biolgica de M3, en ninguno de los marcadores genticos analizados. El anlisis estadstico, teniendo en cuenta los perfiles genticos obtenidos, ha proporcionado una probabilidad de maternidad superior al 99,99 %; por lo que se concluye que M1 es la madre biolgica de M3. 507569 Verificou-se existir incompatibilidade entre os perfis genticos de M1 e M2 em 3 loci (IP = 0), se se desprezar a possibilidade de mutao. A probabilidade de uma mutao, em si um acontecimento raro, ocorrer em 3 ou mais loci simultaneamente praticamente nula. Nessa conformidade pode-se considerar, por referncia aos predicados verbais de Hummel, a maternidade de M1 para com M2 praticamente excluda. No se verificou qualquer incompatibilidade entre os perfis genticos de M1 e M3 para a hiptese colocada. A maternidade no foi excluda, sendo a probabilidade que lhe est associada, considerando-se uma probabilidade a priori de 50%, seguindo a metodologia de Essen-Mller, de 99,9931% (IP = 14466,391). Pode-se considerar, por referncia aos predicados verbais de Hummel, a relao de maternidade entre M1 e M3 como praticamente provada. 507571 Atravs dos perfis allicos obtidos de M1, M2 e M3 foram feitas duas anlises: - Anlise de M1 e M2: Analisando-se o perfil allico de M1 e M2, observou-se que dos 15 marcadores autossmicos estudados, em 7 destes (TH01, D18S51, PENTA E, CSF1PO, PENTA D, VWA e D8S1129) houve incompatibilidade gentica entre as amostras analisadas, sendo que todas as incompatibilidades foram do tipo excluses de primeira ordem. Alm disso, dos 10 marcadores analisados do Cromossomo X, em um destes (DXS7133) no foi possvel obter o gentipo das amostras em questo, porm, em 6 destes (DXS8378, DXS9898, GATA31E08, GATA172D05, DXS6809 e DXS7132) houve incompatibilidade gentica entre M1 e M2. Diante do exposto, conclui-se que M1 pode ser excluda como me biolgica de M2. - Anlise de M1 e M3: Analisando-se os perfis allicos de M1 e M3, observou-se que em todos os marcadores autossmicos estudados houve o compartilhamento de pelo menos um alelo entre as amostras analisadas, podendo M1 ser a me biolgica de M3. Em razo desta constatao, foram calculados o ndice e a Probabilidade de Maternidade de M1 em relao M3. De acordo com os clculos estatsticos (frmulas apresentadas abaixo), verificou-se que a probabilidade de se encontrar os gentipos observados, dado que M1 seja a me biolgica de M3 4.697.449,5724 vezes maior que a probabilidade de se encontrar os gentipos observados, dado que uma mulher qualquer da populao seja a me biolgica de M3. Assumindo-se a probabilidade a priori como sendo 0,5, obteve-se uma Probabilidade de Maternidade de 99,99997871%. Considerando o valor mnimo aceitvel para o ndice de Maternidade como 10.000, o que gera uma Probabilidade de Maternidade de 99,99%, diante dos resultados obtidos para tais ndices, conclui-se que M1 pode ser considerada a me biolgica de M3. Alm disso, a anlise de marcadores do cromossomo X no contraria essa hiptese, pois em nenhum marcador observou-se incompatibilidade gentica entre M1 e M3. 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 13 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM Frmulas utilizadas: Todas as frmulas utilizadas esto descritas no Parentage Testing Accreditation Requirements Manual da American Association of Blood Banks (Third Edition - 1998) e esto apresentadas abaixo. Foram utilizadas as freqncias allicas de Americanos Caucasides (Promega) e Brasileiros Caucasides (Promega). - ndice de Maternidade Parcial (IM parcial) - Locus X Y - D3S1358 0,5 2p TH01 1 2p D21S11 0,5 2p D18S51 0,5 2p Penta E 0,5(p+q) 2pq D5S818 0,5(p+q) 2pq D13S317 1 p D7S820 0,5 2p D16S539 0,5(p+q) 2pq CSF1PO 0,5 2p Penta D 0,5 2p VWA 0,5 2p D8S1179 0,5 2p TPOX 0,5(p+q) 2pq FGA 0,5 2p - ndice de Maternidade Total - IM total = multiplicao dos IM parciais - Probabilidade de Maternidade (W), assumindo-se a probabilidade a priori como sendo 0,5. W = IM total/ (IM total +1) 507572 Se analizaron en total 15 sistemas de ADN. Los resultados sealan lo siguiente: 1. Existe exclusion en siete sistemas de los 15 analizados entre M1 y M2. Por tanto, la mujer donante de M1 no puede ser la madre biolgica del donante de M2. 2. Existe total concordacia entre M1 y M3 para los 15 sistemas de ADN analizados. Por tanto no se puede excluir a M1 como madre biologica de M3. 507573 En seis (6) sistemas autosomicos independientes -CSF1PO/ THO1/ VWA/ D18S51/ D8S1179/ Penta E/- la muestra M1 no presenta los marcadores detectados en M2. Por lo tanto M1 se excluye como madre biolgica de M2 En todos los loci STRs autosmicos independientes analizados, la muestra M1 posee al menos uno de los marcadores presentes en la muestra M3 para cada sistema. En funcin de los sistemas analizados la muestra M1 no puede ser excluda como madre biolgica de la muestra M3 Segn los clculos de probabilidad el Indice de Maternidad es de 127640,7486 y la Probabilidad de Maternidad es de 99,9992 Ref: Bauer et al (Am J Hum Genet 39:1986)/ R E Wenk et al (Transfusion, 36: 259-262, 1996) 507575 Fueron analizados 15 marcadores de STR autosmicos en las 3 muestras recibidas. Analisando los resultados obtenidos con las muestras M1 y M2 fueron encontradas 6 incompatibilidades, por lo tanto se excluye la maternidad de M1 respecto de M2. Analisando los resultados obtenidos con las muestras M1 y M3, y utilizando tablas de frecuencias allicas prpias, fue calculado un Indice de Maternidad acumulado de 16.672.761. Por lo tanto, la probabilidad de maternidad de M1 respecto de M3 fu calculada en 99,99999%. 507576 - SE DESCARTA EL VINCULO BIOLOGICO DE FILIACION MATERNO DE M1 RESPECTO DE M2 - NO SE PUEDE EXCLUIR EL VINCULO BIOLOGICO DE FILIACION MATERNO DE M1 RESPECTO DE M3 - IM:11909859,8 - PM:99,999992 % DATOS OBTENIDOS DEL SOFWARE FAMILIAS 507577 En los sistemas investigados hay inclusin de vnculo entre el hijo (M3) y la madre alegada (M1). El ndice de maternidad es IM= 9.9 x 10 (7) y la probabilidad de que M3 sea hijo biolgico de M1 es del: 99,999998% (Clculos realizados en base a las frecuencias allicas de la poblacin uruguaya) En base a los resultados obtenidos se puede excluir a M2 como hijo biolgico de M1. 507579 Los resultados obtenidos del analisis de las muestras de M1 y M2 mostraron discordancia allica en 6 de los 15 marcadores STRs autosomicos analizados. Los marcadores que presentan discordancia alelica son: D8S1179, 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 14 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM CSF1PO, TH01, D2S1338, vWA, D18S51, con estos resultados se excluye la maternidad de M1 con respecto a M2. No se puede excluir la maternidad de M1 con respecto a M3. Los resultados mostraron concordancia alelica en los 15 STRs autosomicos analizados. El anlisis de los marcadores STRs del cromosoma Y en las muestras M2 y M3, da por resultado el mismo haplotipo lo que sugiere que los dos varones sean muy probablemente hijos del mismo padre, pero de madres diferentes. 507580 Se excluye a M1 como madre biolgica de M2. En el anlisis comparativo entre los perfiles de ADN de los individuos implicados en el caso, se encuentran incompatibilidades en las leyes de la herencia mendeliana, entre los perfiles genticos de la presunta madre biolgica identificada como M1 y el hijo identificado como M2. Hay incompatibilidad en 8 de los 21 marcadores STRs autosmicos estudiados. No se puede excluir a M1 como madre biolgica de M3. En el anlisis comparativos entre los perfiles de ADN de los individuos implicados en el caso, se encuentra que hay correspondencia entre los perfiles genticos de la presunta madre biolgica identificada como M1 y el hijo identificado como M3y se establece una Probabilidad de Maternidad (W) de 99.9999996%, que indica la posibilidad de que en la poblacin no se encuente otro individuo que pueda ser la madre biolgica de M3 y un ndice de Maternidad de 249195125, que indica el nmero de veces que es ms probable que la seora identificada como M1 pueda ser la madre biolgica de M3 en comparacin con un individuo al azar de la Poblacin. Se utiliz la base de datos del Laboratorio de Identificacin Gentica-IdentiGEN , publicada en la revista Forensic Science International 143, 2004, 69-71: Nineteen autosomal microsatellite data from Antioquia - Colombia 507581 El individuo M1 puede ser considerado como madre biolgica del individuo M3 con un porcentaje de maternidad del 99,99997% (I.M.= 2921444,9) tomando como referencia la poblacin espaola. El individuo M1 debe ser excluido como madre biolgica del individuo M2 ya que en 9 de los 13 marcadores analizados los alelos presentes en el individuo M2 no se encuentran en el individuo M1. 507582 Con nuestros sistemas genticos, M1 se excluye como madre de M2 en: CSF1PO, TH01, vWA, D18S51, D21S11, D2S1338, D8S1179, Penta D, Penta E. M2 y M3, exhiben el mismo genotipo para los marcadores del cromosoma Y, lo que sugiere que pertenecen al mismo linaje paterno. 507601 Concluses: M3: Em relao ao suposto filho 2 (M3), os marcadores estudados: a) no revelaram a existncia de excluses incompatveis com a maternidade de M1. b) permitiram calcular para este caso, e de acordo com as frequncias publicadas em Amorim et al. (GEP-ISFG, 2003), um ndice de maternidade de 870861,02538. Estamos perante uma caso de maternidade praticamente provada, em que M1 tem 99,99989% de probabilidade de ser me de M3. M2: Em relao ao suposto filho 1 (M2) os marcadores estudados revelaram a existncia de 6 excluses nos sistemas D8S1179, CSF1PO, THO1, D2S1338, vWA e D18S51 que s seriam compatveis com a hiptese de maternidade em causa invocando a ocorrncia de fenmenos por si raros cuja conjugao simultnea seria em termos prticos impossvel, o que permite excluir M1 como me de M2. Observaes: Os clculos foram confirmados pelo programa informtico "Famlias" e para o marcador D18S51 foi utilizado o valor de frequncia mnima: 0,0100. 507602 A partir de los perfiles genticos analizados para las muestras rotuladas como M1, M2 y M3, podemos concluir: 1) Se excluye el vnculo de maternidad entre la donante de M1 y el de M2 ( Excluye D8S1179,CSF1PO,TH01,D2S1338,VWA,D18S51). 2) No puede excluirse la maternidad biolgica de la donante de M1 con respecto al donante de M2. -El Indice de maternidad calculado con frecuencias de JFS-hispnicos es 8830000. Y la Probabilidad de maternidad correspondiente 99.99999%. -El ndice de maternidad calculado con frecuencias de U.S Hispnicos, de AMPFlSTR Identifiler kit (ABI), es de 15448913 y la Probabilidad de maternidad correspondiente de 99.99999%. (Obs: No encontramos referencias a que frecuencias utilizar para el caso, por eso enviamos 2 clculos) 507603 El perfil de ADN se realiz en muestras colectadas de la madre(M1) y dos supuestos hijos(M2 y M3) Se concluye: 1) M1 es la madre biolgica de M3; debido a que en 15 de los 15 loci probados, el ADN no excluy a la supuesta madre como madre biolgica con una probabilidad de maternidad de: 0,999999963049473 2)M1 no es la madre biolgica de M2; debido a que en 6 de los 15 loci probados, el resultado del ADN excluy a M1 como madre biolgica de M2 507604 M1 no podria ser la madre biologica de M2 ya que cinco de los quince marcadores estudiados indican exclusin de primer orden. 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 15 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM M1 podria ser la madre biologica de M3 ya que ninguna de los marcadores estudiados reportan exclusin, utilizando las frecuencias alelicas reportada de la poblacin caucasoide de Promega obtuvimos una probabilidad de maternidad de 99.9941802% y un indice de maternidad de 12197.4157 con una probabilidad a priori del 0,5. 507605 LA MUJER DONANTE DE M1 NO PUEDE SER LA MADRE BIOLOGICA DEL DONATE DE M2. DEBIDO A QUE DE LOS 19 MARCADORES STRs ANALIZADOS SEIS (6) PRESENTARON EXCLUSION (CSF1PO, THO1, vWA, D18S51, D2S1338, D8S1179). LA MUJER DONANTE DE M1 SI PUEDE SER LA MADRE BIOLOGICA DEL DONATE DE M3. DE LOS 19 STRs ANALIZADOS NO SE PRESENTA NINGUNA EXCLUSION. 507606 As incompatibiliades genticas verificadas em 6 das 15 regies autossmicas estudadas impossibilitam a existncia de vnculo gentico de maternidade entre M1 e M2. As compatibilidades genticas verificadas em todas as 15 regies autossmicas estudadas geram um ndice de Maternidade Combinado de 716.119,36. Portanto, os achados genticos obtidos so aproximadamente 716 mil vezes mais provveis de ocorrerem se M1 e M3 forem me e filha do que se forem dois indivduos no relacionados. 507610 A la vista de los resultados obtenidos no se puede excluir a M1 como presunta madre de M3. La probabilidad de maternidad es del 99,9999% (Ip: 9.707.738) que, segn los Predicados de Hummel, correspondera a una maternidad prcticamente probada. A la vista de los resultados obtenidos se puede excluir a M1 como presunta madre de M2. La probabilidad de maternidad es del 0% que, segn los Predicados de Hummel, correspondera a una maternidad descartada. 507612 A Probabilidade de M1 ser a me de M3 superior a 99,9999; IP= 1072098750,2182. M1 s poderia ser considerada me de M2 invocando uma srie de acontecimentos, cada um dos quais, altamente improvvel e cuja conjugao simultnea seria na prtica impossvel. Assim, exclui-se a possibilidade de M1 ser a me biolgica de M2. 507614 Como resultado del anlisis realizado se concluye que para la mujer donante de la muestra M1, es excluida su maternidad respecto del presunto hijo 1 (muestra M2) para los siguientes sistemas estudiados: CSF1PO; TH01; VWA; D12S1090; D3S1744 y PENTA E. Por lo tanto no puede ser considerada madre biolgica del hijo 1 (muestra M2). Para la mujer donante de la muestra M1, se concluye que no puede ser excluida su maternidad para los siguientes sistemas empleados: CSF1PO; TPOX; TH01; F13A01; FESFPS; VWF; F13B; LPL; D12S1090; D3S1744; D16S539; D7S820; D13S317; D5S818; PENTA E y HPRTB. Por lo tanto es considerada madre biolgica del hijo 2 (muestra M3). 507616 Con los resultados de los genotipos obtenidos se excluye al individuo de la muestra M2 como hijo biolgico de la mujer M1 por incompatibilidad en los marcadores: CSF1PO, D18S51, D2S1338, D8S1179, TH01, vWA, DXS6809, DXS7132, DXS7133, DXS8378, DXS9898, GATA172D05 y GATA31E08. El individuo M3 no puede ser excluido como hijo biolgico del individuo M1, con un porcentaje de maternidad de W = 99,9999% (IP = 970773,8211), tomando como referencia las frecuencias allicas del GEP-ISFG. La probabilidad de maternidad de M1 como madre biolgica de M3 es superior al 99,73%, lo que corresponde a una maternidad practicamente probada segn los predicados verbales de Hummel. 507617 - LA MUESTRA REFERIDA COMO M1 SE EXCLUYE COMO PERTENECIENTE A LA MADRE BIOLOGICA DE LA MUESTRA REFERIDA COMO M2. LOS MARCARDORES EN LOS QUE SE HA ENCONTRADO EXCLUSION SON: CSF1PO, TH01, VWA, D18S51, D2S1338 Y D8S1179. - LA MUESTRA REFERIDA COMO M1 NO SE EXCLUYE COMO PERTENECIENTE A LA MADRE BIOLOGICA DE LA MUESTRA REFERIDA COMO M3. LA PROBABILIDAD DE MATERNIDAD DE LA MUESTRA M1 ES DEL 99.99998%. 507618 1. M1 podra ser la madre biolgica de M2?. La madre biolgica debe compartir con sus hijos al menos un alelo en todos los sistemas genticos analizados. La supuesta madre donante de M1 no comparte al menos un alelo con el individuo donante de M2 en algunos de los 15 microsatlites o STRs independientes analizados. Se observan exclusiones en 6 de los sistemas genticos estudiados (CSF1PO, D18S51, D2S1338, D8S1179, TH01 y vWA31), por lo que la supuesta madre donante de M1 se excluye como madre biolgica del individuo donante de M2. Lo anterior significa en trminos periciales y probabilsticos que la supuesta madre donante de M1 se excluye como madre biolgica del individuo donante de M2. Segn los parmetros internacionales, esto se puede afirmar cuando se encuentran 3 o ms exclusiones en los sistemas analizados. 2. M1 podra ser la madre biolgica de M3? La madre biolgica debe compartir con sus hijos al menos un alelo en todos los sistemas genticos analizados. En los 15 microsatlites o STRs independientes analizados, la supuesta madre donante de M1 comparte al menos un alelo con el individuo donante de M3, por lo que la supuesta madre donante de M1 NO puede ser excluida como madre biolgica del individuo donante de M3. De acuerdo a lo anterior y a las cifras de probabilidad de maternidad acumulada (Wa), la supuesta madre donante de M1 NO se excluye como la madre biolgica del individuo donante de M3. Se encontr una probabilidad de maternidad de 99,9998969895%. Lo mencionado anteriormente significa en trminos periciales y probabilsticos que la MATERNIDAD ESTA PRACTICAMENTE (TECNICAMENTE) PROBADA. Segn los enunciados verbales de Hummel, esto se puede afirmar cuando las cifras son superiores al 99.73%. 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 16 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM 507619 M1 pode ser a me biolgica de M2 tendo em vista que ela no foi excluda na anlise de 32 locos autossmicos analisados no laboratrio. Por outro lado M1 no pode ser me biolgica de M3 pois ela foi excluda em 14 locos autossmicos dos 32 analisados. 507620 M1 foi excluda nos marcadores TH01, D18S51, CSF1PO, VWA, D8S1179 e D2S1338. ndice de Maternidade Total para M2: 970.685,2900 Probabilidade de Maternidade: 99,99989% A probabilidade a priori utilizada foi de 0,5 e foi utilizada a frequencia allica mnima no caso do marcador D18S51. 507643 M1 presenta 6 discrepancias en 19 sistemas STRs estudiados frente a M2. La maternidad se excluye. No se excluye a M1 como madre de M3 con una probabilidad acumulada de maternidad de 99,99999% y un ndice de maternidad de 21948.309 probabiliades a favor de la maternidad de M3. En las muestras de M2 y M3 se identific un haplotipo de 17 STRs del cromosoma Y 100% condordante por lo cual se concluye que M2 y M3 comparten patrilnea. 507644 Se han detectado 6 exclusiones de primer orden para la muestra M2 (CSF1PO, D18S51, D2S1338, D8S1179, TH01, TPOX,vWA) con lo que se descarta la paternidad de M1 respecto de M2. 507645 CONCLUSO: M1 PODE SER CONSIDERADA ME BIOL GICA DE M3, VISTO QUE DOS 15 LOCI ANALISADOS TODOS INCLUEM. J O MESMO NO OCORREU COM O M2, POIS DOS 15 LOCI ANALISADOS FORAM VERIFICADOS 06 INCONSISTNCIAS, PORTANTO M1 NO PODE SER CONSIDERADA ME BIOL GICA DO MESMO. 507646 M1 poderia ser a me biolgica de M2? M1 no pode ser considerada me biolgica de M2, pois foram observadas 10 excluses dentre os marcadores estudados (ACTBP2-SE33, D1S1656, CSF1PO, TH01, VWA, D18S51, D2S1338, D8S1179, PENTA D e PENTA E). M1 poderia ser a me biolgica de M3? Sim, M1 poderia ser a me biolgica de M3, pois no foi observada nenhuma excluso nos marcadores estudados. Considerando os marcadores: CSF1PO, TH01, TPOX, VWA, FGA, D13S317, D16S539, D18S51, D19S433, D21S11, D2S1338, D3S1358, D5S818, D7S820 e D8S1179, obtivemos uma IM (ndice Maternidade Total) de 3.877,5036. 507647 CONCLUSIONES DE LA FILIACION DE M1 CON RESPECTO A M2: Con los resultados obtenidos se excluye a la mujer donante de M1 de ser la madre biologica del donante de M2 por los sistemas: CSF1PO, THO1, VWA, D8S1179, D18S51, Penta D y Penta E. CONCLUSIONES DE LA FILIACION DE M1 CON RESPECTO A M3: Con los resultados obtenidos no es posible excluir a la mujer donante de M1 de ser la madre biologica del donante de M3. IP total: 60719080,1810 W: 99,9999% Nota: Los clculos para el IP total y la W, fueron realizados utilizando la base de datos para marcadores STRs autosmicos de nuestro laboratorio. 507649 Las muestras dos y tres correspondientes a hijos de la muestra 1 madre, son hermanos pero solo de padre como lo demuestra el estudio de cromosoma Y que se realiz a las dos muestras La muestra tres correspondiente al Hijo 2 de la madre de la muestra 1 es el verdadero hijo, con un IP de 261157 y con una probabilidad del 99,999% 507675 O no compartilhamento de alelos entre M1 e M2 nos loci D8S1079, CSF1PO, TH01, vWA e D18S51 nos permite concluir pela EXCLUSO de maternidade de M1 em relao a M2. O compartilhamento de, pelo menos, 1 alelo entre M1 e M3 em todos os 15 loci analisados nos permite concluir pela NO EXCLUSO de maternidade de M1 em relao a M3, com uma Probabilidade de Maternidade de 99,9998 %. 507731 ADN nuclear: M1 queda excluda como madre biolgica de M2 por los siguientes marcadores:CSF1PO, TH01, VWA, D18S51, D2S1338, D8S1179, Penta D, y Penta E. ADN mitocondrial: 1.- El haplotipo evidenciado en M1 NO COINCIDE con el evidenciado en M2, por lo que M1 no puede ser la madre biolgica de M2. El haplogrupo ms probable al que pertenece el haplotipo evidenciado en M1 es el HG-H y en M2 es el HG-I. 2.- El haplotipo evidenciado en M1 COINCIDE con el evidenciado en M3, por lo que no se puede descartar que ambos donantes pertenezcan a la misma lnea materna. El haplogrupo ms probable al que pertenece este haplotipo es el HG-H. CONCLUSIONES GENERALES: Se excluye con toda seguridad que el donante de M1 sea la madre biolgica del donante de M2. No se puede descartar que el donante de M1 sea la madre biolgica del donante de M3. 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 17 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM Tras los resultados obtenidos en el anlisis de STRs autosmicos y considerando las siguientes hiptesis: H1: M3 es hijo de M1 H2: M3 es hijo de otra persona no relacionada con M1, el IP result ser de 970.773,6, lo que significa que es 970.773,6 veces ms probable que M1 y M3 tengan los perfiles observados si estn emparentados por una relacin Madre-Hijo que si no estn relacionados entre s Los anlisis de ADN mitocondrial apoyan estos resultados. Se significa que el haplotipo evidenciado en M1 y M3 es uno de los ms frecuentes en poblacin europea. Tras la bsqueda de dicho haplotipo (D-loop completo) en la base de datos EMPOP (n = 5173), se han encontrado 81 haplotipos idnticos, todos ellos en West Eurasia. Adems se han encontrado 150 haplotipos con una diferencia y 174 con dos diferencias. Estos datos varan si no se introduce el polimorfismos 16519C debido a la presencia de un gran nmero de haplotipos parciales (slo HVS1 y HVS2) en EMPOP. OBSERVACIONES: Se significa que a la vista de los resultados obtenido en el anlisis de Y-STRs, M2 y M3 podran estar emparentados por va paterna. El haplogrupo ms probable al que puede pertenecer dicho haplotipo es el HG- R1b. Realizada la bsqueda de este haplotipo en la base de datos YHRD (n = 23.073) se han encontrado 9 haplotipos idnticos, 7 de ellos reseados en dicha base como europeos. 507732 El perfil gentico de M1 debe compartir al menos un alelo con el perfil de sus hijos biolgicos en todos los sistemas genticos analizados. Vemos que M1 y M2 no comparten alelos en OCHO (8) de los sistemas analizados: HUMCSF1PO, HUMTH01, HUMVWA31, D18S51, D2S1338, D8S1179, Penta E y Penta D, por lo tanto se excluye de la maternidad. Se observa tambin que M1 y M3 comparten alelos en todos los sistemas genticos analizados por lo tanto no se excluye de la maternidad. Se calcul entonces la probabilidad que tiene de ser la madre biolgica tomando como referencia la tabla de frecuencias que se adjunta en el anexo del ejercicio y las frecuencias de Hispanoamericanos informadas por la casa comercial Promega para los sistemas Penta E y Penta D. Se tiene entonces que es 13755477 veces ms probable que M1 sea la madre biolgica de M3 a que no lo sea, con una Probabilidad de maternidad de 99,99999%. Conclusin 1: M1 se excluye como la madre biolgica de M2. Conclusin 2: M1 no se excluye como la madre biolgica de M3. Para la realizacin de los clculos se emple el programa PATPCR version 2.0 de Juan A. Luque. 507736 La mujer donante de M1 no puede ser excluida como la Madre biolgica del donate de M3, ya que se encontr coincidencia en los 15 marcadores STR utilizados. La mujer donante de M1 no puede la Madre biolgica del donate de M2, ya que se encontr que no hubo coincidencia en 7 de los 15 marcadores STR utilizados. 507737 EN 16 MARCADORES GENTICOS ANALIZADOS NO SE OBSERVAN EXCLUSIONES ENTRE M1 Y M3. EL CALCULO ESTADSTICO MUESTRA UN IP DE 187616,883 Y UNA PROBABILIDAD DE MATERNIDAD PP DE 99,999467%. PARA EL ESTUDIO DE MATERNIDAD ENTRE M1 Y M2 SE OBSERVAN 6 EXCLUSIONES ENTRE MADRE ALEGADA E HIJO PARA ESTOS SISTEMAS ESTUDIADOS, DESCARTNDOSE EL VINCULO BIOL GICO DE MATERNIDAD. 507738 1- Los resultados obtenidos mediante el anlisis de STRs autosmicos muestran exclusin de la mujer donante de la muestra M1 como madre biolgica del individuo donante de la muestra M2, en los sistemas genticos: CSF1PO, TH01, VWA, D18S51, D8S1179, PENTA E y PENTA D. En el estudio de los segmentos hipervariables HVI y HVII se observan diferentes haplotipos de ADN mitocondrial (diferentes variaciones respecto a CRS) en ambas muestras, por lo tanto no hay relacin de parentesco por va matrilineal entre la mujer donante de la muestra M1 y el individuo donante de la muestra M2. La mujer donante de la muestra M1, no es la madre biolgica del individuo donante de la muestra M2. 2-Los resultados obtenidos mediante el anlisis de STRs autosmicos no muestran exclusin de la mujer donante de la muestra M1 como madre biolgica del individuo donante de la muestra M3, en ninguno de los sistemas genticos estudiados. El anlisis estadstico de la probabilidad de maternidad de la mujer donante de la muestra M1 respecto del individuo donante de la muestra M3, se ha realizado teniendo en cuenta la estructura genotpica de la mujer donante de la muestra M1 y la distribucin de los distintos marcadores genticos analizados en la poblacin de referencia (base de datos propia) y ha proporcionado un NDICE DE MATERNIDAD de 75.772.409,68 y una PROBABILIDAD DE MATERNIDAD de 99,999999%. Segn la escala de Hummel el valor de probabilidad de maternidad obtenido corresponde a una maternidad 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 18 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM prcticamente probada. 507739 RESULTADOS: 1. Se estudiaron 22 marcadores genticos de diferentes cromosomas y 9 de estos marcadores excluyen a M1 como presunta madre biolgica de M2. Presenta exclusiones en los siguientes marcadores: ACTBPE (SE33), CSF1PO, TH01, vWA, D18S51, D2S1338, Penta D y Penta E. 2.Se estudiaron 22 marcadores genticos de diferentes cromosomas y niguno de stos marcadores permite excluir a M1 como madre biolgica de M3. ANLISIS ESTADSTICO: M1 con respecto a M3 Valor de X=1.43386123x10-10 Valor de Y=1.298345614x10-19 Indice de Maternidad=1104375610 Probabilidad de maternidad (W)=99.9999999% Predicado verval (Hummel)=Maternidad Prcticamente Probada CONCLUSIONES: 1. El estudio de los diversos marcadores genticos moleculares utilizados no ha permitido excluir a M1 como madre biolgica de la M3. 2. El anlisis estadstico de la probabilidad de maternidad de M1 respecto a M3, teniendo en cuanta la estructura genotpica de la presunta madre (Valor X) y la distribucin de los distintos marcadores analizados en la poblacin (Valor de Y), ha concedido una probabilidad de maternidad del 99.9999999% que corresponde, segn los predicados verbales de Hummel, a una maternidad prcticamente probada. 3. El estudio de los diversos marcadores genticos moleculares utilizados ha permitido excluir a M1 como madre biolgica de la M2. 4. Se tipificarn 16 marcodores del Cromosoma Y obtenindose un haplotipo idntico para las muestras M2 y M3. Se consulta la base de datos YFiler Database y se busca el haplotipo para los 16 marcadores, dicho haplotipo no aparece en la base de datos de 597 haplotipos de la poblacin hispana. Por lo tanto se concluye que las muestras M2 y M3 comparten el mismo linaje paterno. 507740 Procedendo a uma anlise parcial da presumvel relao biolgica entre M1 e M2 (negligenciando a informao gentica de M3), utilizando as frequncias allicas dos STRs autossmicos da nossa populao e taxas de mutao, obtivemos: - IM (ndice de maternidade) = 1,3E-28 e PM (Prob. de maternidade) = 1,3E-28 (1,3E-26 %), Uniform Model (Dawid et al, 2001); - IM = 1,4E-31e PM = 1,4E-31 (1,3E-26 %), Stepwise Stationary Model (Dawid et al,, 2001). Qualquer dos modelos resulta num valor percentual de PM muito inferior a 0.27%. Segundo a Escala de Hummel, tal valor corresponde a maternidade praticamente excluda. Procedendo de forma semelhante com a presumvel relao biolgica entre M1 e M3: - IM = 1856727119 e PM = 0,9999999995 (99,99999995 %), Uniform Model (Dawid et al, 2001); - IM = 1847440897 e PM = 0,9999999995 (99,99999995 %), Stepwise Stationary Model (Dawid et al, 2001) O valor percentual de PM muito superior a 99.73%. Assim, a maternidade considera-se praticamente provada (Escala de Hummel). Procedendo a uma abordagem total (considerando simultaneamente as informaes genticas de M1, M2 e M3) formulmos dez hipteses genealgicas: H1: M1 me de M2 e M3. Estes partilham tambm o mesmo pai;H2: M1 me de M2 e M3. Estes no partilham o mesmo pai;H3: M1 me apenas de M2. Estes partilham o mesmo pai;H4: M1 me apenas de M3. Estes partilham o mesmo pai;H5: M1 me apenas de M2. Estes no partilham quaisquer progenitores;H6: M1 me apenas de M3. Estes no partilham quaisquer progenitores;H7: M1 no me de M2 nem de M3. Estes partilham os mesmos progenitores;H8: M1 no me de M2 nem de M3. Estes partilham a mesma me;H9: M1 no me de M2 nem de M3. Estes partilham o mesmo pai;H10: M1 no me de M2 nem de M3. Estes no partilham quaisquer progenitores. Os clculos para o modelo Stepwise esto indicados na Tabela: Hiptese Prob a priori Razo de verosimilhana Prob a a H1 0,0556 5,6903E-23 9,4786E-33 H2 0,0556 2,4777E-22 4,1273E-32 H3 0,1111 1,2109E-32 4,0341E-42 H4 0,1111 1154214252,9974 0,3845 H5 0,1111 1,3703E-31 4,5652E-41 H6 0,1111 1847440543,0433 0,6155 H7 0,1111 0,0016 5,3071E-13 H8 0,1111 0,6187 2,0614E-10 H9 0,1111 0,6245 2,0804E-10 H10 0,1111 1,0000 3,3315E-10 9.- Resultados Caso Prctico Paternidad Pgina 19 de 19 Ejercicio GEP-ISFG 2007 INTCFM Por observ. da tabela, a hiptese mais provvel a H6. Todavia, o valor percentual da sua probabilidade apenas de cerca de 61,6 % (Stepwise model). Segundo a Tabela de Hummel, H6 no fica praticamente provada.Uma nova hiptese formada pela aglomerao de H4 e H6 - M1 me apenas de M3. Estes podem partilhar ou no o mesmo pai - por si s tornar-se-ia praticamente exaustiva, atingindo um valor de probabilidade percentual a posteriori de 99,9999999 %. Uma vez mais esta abordagem total refora a ideia de M1 ser apenas me de M3, podendo este ter ou no um vnculo biolgico, por via da linha genealgica paterna com M2. Em apoio desta ltima possibilidade, vem o facto de ter sido observada a partilha do mesmo hapltipo Y